Специфические IgE в крови к аллергену g213 Тимофеевка луговая, рекомбинантный компонент (rPhl p1, rPhl p5b) ImmunoCAP

Phl p 1 и Phl p 5b — два мажорных видоспецифических аллергена пыльцы тимофеевки луговой (Phleum pratense), наиболее значимого представителя злаковых трав умеренного климата. Phl p 1 относится к аллергенам 1-й группы злаковых (бета-экспансины), его молекулярная масса составляет около 27 кДа. Phl p 5b принадлежит к аллергенам 5-й группы, уникальной для подсемейства мятликовых (Pooideae), с молекулярной массой около 32 кДа. По данным эпидемиологических исследований, IgE к Phl p 1 выявляются у 83–99% пациентов с аллергией на пыльцу злаковых трав, IgE к Phl p 5 — у 50–90%, в зависимости от возрастной группы и региона. Оба белка являются маркерами первичной (истинной) сенсибилизации к пыльце злаков и ключевыми показателями при решении вопроса о назначении АСИТ. Тест g213 определяет суммарный уровень специфических IgE к рекомбинантным Phl p 1 и Phl p 5b одновременно и применяется для подтверждения видоспецифической сенсибилизации к злаковым, разграничения истинной аллергии от перекрёстной реактивности через паналлергены и обоснования иммунотерапии.

Группа: ингаляционный аллергокомпонент (пыльца злаковых трав, семейство Poaceae, подсемейство Pooideae). Рекомбинантные белки (префикс r).

Аллергенный профиль Phl p 1 и Phl p 5b:

• Phl p 1 — гликопротеин из семейства бета-экспансинов. Аллергены 1-й группы присутствуют в пыльце всех злаковых трав без исключения, что обеспечивает их высокую диагностическую чувствительность, но одновременно ограничивает видовую специфичность. Рекомбинантный Phl p 1 (rPhl p 1) не содержит углеводных цепей, однако по структуре IgE-связывающих эпитопов близок к нативному белку. Исследования демонстрируют, что определение IgE к одному только rPhl p 1 обеспечивает чувствительность 98% и специфичность 92% для диагностики аллергии на пыльцу злаков. Сенсибилизация к Phl p 1 формируется раньше других компонентов в ходе естественного течения аллергического заболевания и выявляется уже у детей раннего возраста.
• Phl p 5b — белок 5-й группы злаковых аллергенов, представленной исключительно в подсемействе Pooideae (тимофеевка, ежа, райграс, мятлик, овсяница). Это определяет его более высокую видовую специфичность по сравнению с Phl p 1. Белок существует в двух изоформах — 5a и 5b, обладающих различными паттернами IgE-связывания и значительной (25–30%) вариабельностью аминокислотной последовательности. Phl p 5b содержит по меньшей мере на один IgE-связывающий эпитоп больше, чем Phl p 5a, что может объяснять его высокую аллергенность. Сенсибилизация к Phl p 5 нарастает с возрастом пациента и с увеличением уровня общих IgE к пыльце злаков. У взрослых частота сенсибилизации к Phl p 5b достигает 80–90%, тогда как у детей она ниже.

Комбинированное определение IgE к Phl p 1 и Phl p 5b в одном тесте (g213) обеспечивает максимальный охват пациентов с истинной злаковой аллергией. Phl p 1 является наиболее чувствительным маркером (практически не пропускает сенсибилизированных пациентов), а Phl p 5b повышает специфичность для подсемейства Pooideae.
Помимо Phl p 1 и Phl p 5, пыльца тимофеевки содержит ряд других аллергенных компонентов: Phl p 2 и Phl p 6 (видоспецифические аллергены 2-й и 6-й групп), Phl p 4 (бербериновый мостиковый фермент), Phl p 7 (полкальцин, паналлерген), Phl p 11 (Ole e 1-подобный белок), Phl p 12 (профилин, паналлерген). Положительный результат на g213 (rPhl p 1 + rPhl p 5b) при отрицательных IgE к Phl p 7 и Phl p 12 однозначно указывает на истинную злаковую сенсибилизацию. Обратная ситуация — отрицательный g213 при положительных Phl p 7 или Phl p 12 — свидетельствует о паналлергенной природе реактивности.

Источники экспозиции: Основной путь сенсибилизации — ингаляционный. Тимофеевка луговая широко распространена в умеренном климате Европы, России, Северной Америки. Цветение злаковых трав в средней полосе приходится на май–июль, с пиком пыления в июне. Тимофеевка является доминирующим аллергенным злаком в Европе, где сенсибилизация к ней выявляется у 20–30% населения разных стран (например, 28,5% в Германии). Аллергенный состав пыльцы тимофеевки принят за референсный для всего подсемейства мятликовых, поскольку ключевые аллергены (группы 1, 5, 2, 6) обладают высокой гомологией среди родственных видов.
Дополнительные источники экспозиции к аллергенам злаковых включают сенокос и работу с сеном, стрижку газонов, пребывание на спортивных площадках и полях. В отдельных случаях аллергены 1-й группы злаков могут обнаруживаться в зерновой пыли (пшеница, рожь, ячмень), однако клиническое значение этого пути для развития респираторной сенсибилизации невелико.

Клиническое значение сенсибилизации

Особенности:

Phl p 1 и Phl p 5b являются видоспецифическими мажорными компонентами пыльцы злаков. Положительный результат g213 у пациента с респираторными симптомами в сезон цветения трав (май–июль) является надёжным подтверждением того, что причиной поллиноза являются именно злаковые. Это принципиально отличает результат от теста на цельный экстракт тимофеевки, который может быть положительным за счёт паналлергенов (профилина Phl p 12 или полкальцина Phl p 7), общих с пыльцой деревьев, сорных трав и многими пищевыми продуктами.
Тест g213 занимает центральное место в алгоритме обследования перед назначением АСИТ с аллергенами пыльцы злаков. Действующие терапевтические препараты для АСИТ злаковой аллергии (как сублингвальные, так и подкожные) содержат преимущественно аллергены тимофеевки или смеси злаков подсемейства Pooideae. Эффективность этих препаратов доказана для пациентов, сенсибилизированных к мажорным видоспецифическим компонентам (Phl p 1, Phl p 5). У пациентов с изолированной сенсибилизацией к паналлергенам (Phl p 7, Phl p 12) ожидаемая эффективность АСИТ ниже, и назначение терапии в такой ситуации требует дополнительного обоснования.
Если у пациента с положительным результатом на цельный экстракт тимофеевки тест g213 отрицательный, а IgE к Phl p 12 (профилину) или Phl p 7 (полкальцину) положительны, это указывает на паналлергенную природу сенсибилизации. Множественные положительные результаты на пыльцу злаков, деревьев и сорных трав у такого пациента объясняются не истинной полисенсибилизацией, а перекрёстной реактивностью через повсеместно распространённые минорные белки.
Возрастные особенности сенсибилизации имеют клиническое значение. В педиатрических когортах Phl p 1 обнаруживается практически у всех сенсибилизированных детей (99%), тогда как Phl p 5 выявляется реже (67%) и его значимость нарастает с возрастом. Это означает, что у детей младшего возраста отрицательный результат на Phl p 5 при положительном Phl p 1 не противоречит диагнозу злаковой аллергии, а отражает естественную эволюцию сенсибилизационного профиля.

Перекрёстная реактивность:

Внутри подсемейства Pooideae. Phl p 1 обладает выраженной гомологией с аллергенами 1-й группы других злаков умеренного климата: ежи сборной (Dac g 1), райграса пастбищного (Lol p 1), мятлика лугового (Poa p 1), овсяницы (Hol l 1), душистого колоска (Ant o 1). Перекрёстная реактивность между этими аллергенами высока, что объясняет, почему пациент с аллергией на тимофеевку, как правило, реагирует на пыльцу всех злаков подсемейства Pooideae. Phl p 5 ещё более специфичен для Pooideae: аллергены 5-й группы не обнаружены у тропических и субтропических злаков.
С пыльцой злаков других подсемейств. Перекрёстная реактивность между Phl p 1 и Cyn d 1 (мажорным аллергеном бермудской травы, подсемейство Chloridoideae) частична. Phl p 5 не имеет гомолога в бермудской траве, поэтому в регионах, где произрастают и мятликовые, и хлоридоидные злаки, комбинация Phl p 1 и Phl p 5 помогает определить первичный сенсибилизирующий источник. Отрицательный Phl p 5 при положительном Phl p 1 в сочетании с высоким уровнем IgE к Cyn d 1 может указывать на первичную сенсибилизацию к бермудской траве.
С зерновыми культурами. Phl p 5b продемонстрировал перекрёстную реактивность с аллергенами 5-й группы некоторых зерновых (пшеница, рожь), однако клиническое значение этой перекрёстной реактивности для развития пищевой аллергии невелико. Пыльцево-пищевой синдром при злаковой аллергии выражен значительно слабее, чем при берёзовом поллинозе. У части пациентов описан оральный аллергический синдром на томат, дыню, арбуз, апельсин, персик и пшеничную муку, однако он опосредован преимущественно профилином (Phl p 12) или перекрёстно-реактивными углеводными детерминантами (CCD), а не мажорными компонентами Phl p 1 и Phl p 5.

Типичные проявления:

Частые: сезонный аллергический риноконъюнктивит в период цветения злаковых трав (май–июль) — заложенность носа, чихание, обильная водянистая ринорея, зуд глаз, слезотечение, светобоязнь. Злаковый поллиноз — одна из наиболее распространённых форм сезонной аллергии в умеренном климате, существенно снижающая качество жизни в период пыления.

Менее частые: сезонная бронхиальная астма — кашель, затруднённое дыхание, свистящие хрипы, нарастающие в сезон пыления. «Грозовая астма» (thunderstorm asthma) — резкое обострение бронхоспазма при грозе в сезон цветения злаков, связанное с высвобождением аллергенных частиц при разрушении пыльцевых зёрен под действием осмотического шока. Обострение атопического дерматита в летние месяцы. Оральный аллергический синдром на томат, дыню, арбуз, персик, пшеничную муку (опосредован преимущественно профилином Phl p 12, а не мажорными компонентами).

Редкие: профессиональная аллергия у работников сельского хозяйства, озеленителей, газонокосильщиков при интенсивном контакте с пыльцой и сеном. Анафилаксия, ассоциированная со злаковой аллергией, описана в единичных случаях, преимущественно при сочетании ингаляционного контакта с кофакторами (физическая нагрузка, приём НПВС), а также при пищевой аллергии на пшеницу (omega-5 глиадин, Tri a 19), которая представляет собой отдельный патогенетический механизм, не связанный с Phl p 1 и Phl p 5.

Как работает анализ на специфические IgE

Метод ImmunoCAP определяет в крови уровень специфических IgE — антител, которые иммунная система вырабатывает в ответ на конкретный аллерген. Именно эти антитела запускают симптомы аллергии: насморк, слезотечение, кожные реакции, затруднённое дыхание. Анализ позволяет установить, есть ли у пациента сенсибилизация к определённому веществу, и измерить её выраженность.

Платформа ImmunoCAP включает несколько типов тестов. Исследование цельного аллергенного экстракта подтверждает сенсибилизацию к источнику в целом — например, к эпителию кошки или пыльце берёзы. Молекулярные компоненты позволяют уточнить, к какому именно белку аллергена направлен ответ: это помогает разграничить истинную аллергию и перекрёстные реакции, когда организм реагирует на похожие белки из разных источников.

Знание конкретного белка-виновника имеет практическое значение. Одни белки связаны с риском системных реакций, другие — только с местными симптомами. Кроме того, результаты молекулярной диагностики учитываются при подборе аллерген-специфической иммунотерапии — единственного метода лечения, способного изменить течение аллергического заболевания, а не только устранить симптомы.

Подробнее о принципе работы метода, типах тестов и интерпретации результатов — на странице «Специфические IgE методом ImmunoCAP: принцип, возможности и границы применения анализа крови на аллергию»