Рак предстательной железы: иммуногистохимическое исследование (ИГХ) с оценкой экспрессии: альфа-метилацил-КоА-рацемазы (P504S, AMACR), цитокератинов высокого молекулярного веса (34ßE12), белка p63, парафиновый блок.

Рак предстательной железы (РПЖ) входит в число наиболее частых онкологических заболеваний, поражающих мужское население разного возраста. Ранняя диагностика этого заболевания является приоритетной задачей современной урологии. Трансректальная биопсия предстательной железы с последующим гистологическим исследованием биоптата – метод, считающийся «золотым стандартом» диагностики при подозрении на РПЖ. Исследование позволяет выявить у пациента предраковое поражение (простатическая интраэпителиальная неоплазия: ПИН – prostatic intraepithelial neoplasia: PIN) или рак, а также определить локализацию опухоли, протяженность опухоли в биоптате, наличие периневральной инвазии или инвазии капсулы предстательной железы, стадию дифференцировки опухолевых клеток (градация по шкале Глисона). Однако, у части пациентов невозможно безошибочно определить злокачественный потенциал морфологических изменений, в частности, при выявлении так называемой атипической мелкоацинарной пролиферации» (atypical small acinar proliferation – ASAP). Этот термин используется в случаях, когда в биоптате выявляются фокусы атипических желез, подозрительных на аденокарциному, но, в то же время, не соответствующих минимальным диагностическим критериям РПЖ. Однако, данное определение является субъективным, собирательным, включает в себя как морфологические изменения, подозрительные в отношении аденокарциномы, так и фокусы аденокарциномы, в объеме не достаточном для постановки диагноза. В таких случаях необходимо комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование. Для проведения иммуноморфологического анализа используются маркёры рака предстательной железы. Их можно условно поделить на два типа: • Маркёры, которые используются для подтверждения диагноза РПЖ. • Маркёры, которые определяют степень злокачественности РПЖ. Ск-5. К первой группе относятся цитокератины. Повышенная экспрессия цитокератина Ск-5 может указывать на развитие низкодифференцированной аденокарциномы простаты. Р-63. Маркёр Р-63 представляет собой белок, который контролирует протекание процессов клеточного цикла. Кроме этого, он следит за наличием повреждений в геноме, которые впоследствии могут привести к развитию патологического процесса. Повышение уровня онкомаркёра Р-53 может свидетельствовать о развитии рака простаты. Альфа-метилацил-КоА-рацемаза (AMACR). Альфа-метилацил-КоА-рацемаза (AMACR) представляет собой митохондриальный и пероксисомальный фермент, который сверхэкспрессируется при раке предстательной железы. Иммуногистохимия с использованием анти-анти-AMACR/P504S полезна для выявления рака простаты во всём спектре образцов её ткани, будь то игольная биопсия, трансуретральная трепан-биопсия или простатэктомия. Параллельное исследование экспрессии AMACR, СК5 и белка Р63 рекомендовано Международным обществом урологической патологии (International Society of Urological Pathology – ISUP) при иммуногистохимическом исследовании биоптатов простаты, для выявления мелких очагов атипичных желез при подозрении на аденокарциному предстательной железы. Повышенная экспрессия AMACR в комбинации с отсутствием маркёров базальных клеток (высокомолекулярных цитокератинов СК5 и белка Р63) – типичны для классической ацинарной аденокарциномы простаты. AMACR (P504S, альфа-метилацил-коэнзим А рацемаза) – белок, участвующий в бета-окислении разветвленных жирных кислот и метаболизме желчных кислот. Присутствие этого белка можно обнаружить в нормальных тканях – печени (гепатоциты), почках (тубулярный эпителий), легких (эпителий бронхов), желчном пузыре и др. В качестве маркёра опухолей он рассматривается с 2000 года, когда было продемонстрировано, что карциномы простаты характеризуются повышенной экспрессией AMACR. Это не является уникальным для рака предстательной железы. Повышенная экспрессия AMACR выявлена в карциномах - колоректальных, овариальных, груди, мочевого пузыря, легких, почечно-клеточных, а также лимфомах и меланоме. Считается, что это потенциально важный маркер различных видов рака и соответствующих предраковых поражений, в особенности, ассоциируемых с высоким потреблением животных жиров. В исследованиях уротелиального рака отмечается положительная корреляция между экспрессией AMACR, высокой гистопатологической градацией опухоли и опухолевой прогрессией. Гиперэкспрессия AMACR в опухолевой ткани делает этот фермент потенциальной мишенью для противоопухолевой терапии. AMACR является высокоэффективным и чувствительным маркером при иммуногистохимической диагностике РПЖ и позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью дифференцировать рак предстательной железы от других патологических процессов, а также более точно определить стадию заболевания. По данным исследований, маркер позитивен в 80-100% случаев карцином простаты и ПИН высокой степени. Белок Р63 экспрессируется в ядрах базальных клеток различных видов эпителия, является транскрипционным фактором, играя ключевую роль в регуляции процессов пролиферации и дифференцировки эпителия и тканевого гомеостаза. Ген Р63 находится на хромосоме 3q27-29 и принадлежит к семейству p53 опухолевых супрессорных генов, связанных с регуляцией клеточного цикла, апоптоза и опухолевой трансформации. Роль этого белка при раке (как в качестве опухолевого супрессора, так и онкогена) продолжает исследоваться. Определение экспрессии р63 является важным инструментом для дифференцировки между доброкачественными и злокачественными изменениями в предстательной железе (а также может использоваться для дифференцировки плоскоклеточного рака легких и аденокарциномы легких, плоскоклеточного рака шейки и аденокарциномы шейки матки, рака молочной железы in situ и аденокарциномы молочной железы). Высокомолекулярные цитокератины СК-5 и p63, характерны для базального эпителия предстательной железы, исследование их экспрессии в комбинации с белком p63 повышает информативность и специфичность иммуногистохимического исследования биоптатов простаты. При РПЖ экспрессия цитокератинов высокомолекулярного веса (HMW) значительно снижается, что выявляется при ИГХ-исследовании.