Посев крови на аэробные и анаэробные бактерии с определением чувствительности к антибиотикам

Посев на аэробные и анаэробные бактерии с определением чувствительности к антибиотикам представляет собой микробиологическое исследование крови, при котором выявляют жизнеспособные бактерии в кровотоке, идентифицируют выделенный микроорганизм и определяют чувствительность клинически значимого штамма к антибактериальным препаратам. В норме кровь не содержит размножающихся бактерий. Их появление в сосудистом русле обозначается как бактериемия и возникает при проникновении возбудителя из инфекционного очага либо при его непосредственном поступлении из поражённых эндокардиальных структур или инфицированных внутрисосудистых устройств. Бактериемия может быть кратковременной, периодической или персистирующей, а характер поступления микроорганизмов в кровь зависит от источника инфекции и особенностей патологического процесса. Для культивирования кровь распределяют между флаконами, обеспечивающими рост бактерий при различных условиях насыщения кислородом. Один набор гемокультур обычно включает аэробный и анаэробный флаконы, благодаря чему выявляются облигатные анаэробы, аэробные микроорганизмы и широкий круг факультативно-анаэробных бактерий. Последние способны размножаться в обоих типах среды, поэтому обнаружение одного микроорганизма одновременно в аэробном и анаэробном флаконах не означает присутствия двух разных возбудителей и само по себе не свидетельствует о выделении облигатного анаэроба. После регистрации бактериального роста материал из положительного флакона исследуют микроскопически с окраской по Граму, что позволяет определить морфологию микроорганизмов и получить предварительную характеристику выросшей бактерии ещё до завершения идентификации. Затем выполняют пересев на питательные среды, получают изолированную культуру и устанавливают таксономическую принадлежность возбудителя. Для клинически значимого изолята исследуют чувствительность к антибактериальным препаратам.

Клиническое значение

Посев крови используют при подозрении на бактериемию и инфекцию кровотока , когда микроорганизмы проникают в сосудистое русло из первичного инфекционного очага или поступают непосредственно из инфицированных внутрисосудистых и эндокардиальных структур. Источником бактериемии могут становиться инфекции лёгких, мочевыводящих путей, органов брюшной полости, кожи и мягких тканей, костей и суставов. При лихорадке с ознобом, артериальной гипотензии, выраженном ухудшении общего состояния и других проявлениях тяжёлой бактериальной инфекции положительная гемокультура подтверждает присутствие жизнеспособного возбудителя в крови и позволяет установить его вид. При сепсисе инфекционный процесс сопровождается дисрегулированным ответом организма и развитием жизнеугрожающей органной дисфункции, при этом антибактериальная терапия обычно начинается до завершения микробиологической диагностики. Если посев крови становится положительным, лаборатория получает возбудителя в культуре, идентифицирует его и определяет чувствительность выделенного штамма к антибиотикам. Полученные данные позволяют скорректировать первоначальную эмпирическую терапию с учётом фактического возбудителя и выявленной устойчивости. Отрицательная гемокультура не исключает сепсис, поскольку диагноз устанавливается по клиническим признакам инфекции и органной дисфункции, а культуральный результат зависит от присутствия жизнеспособных бактерий в исследованной крови. 
При подозрении на инфекцию кровотока у взрослого обычно исследуют два независимых набора гемокультур, полученных при двух отдельных периферических венепункциях, а в отдельных клинических ситуациях количество наборов увеличивают до трёх. Независимое получение проб из разных венепункций одновременно позволяет оценить воспроизводимость положительного результата: повторное выделение одного и того же микроорганизма в нескольких наборах убедительно подтверждает его присутствие в кровотоке, тогда как единичный рост типичного представителя кожной микробиоты только в одной пробе повышает вероятность контаминации во время взятия крови. Поэтому число независимо положительных гемокультур является частью интерпретации результата, а исследование одной единственной пробы существенно ограничивает возможность отличить истинную бактериемию от случайного загрязнения материала. 
При инфекционном эндокардите микроорганизмы размножаются на поражённом эндокарде, клапанах сердца или внутрисердечном протезном материале и длительно поступают оттуда в сосудистое русло. Такой механизм формирует преимущественно постоянную бактериемию, поэтому один и тот же возбудитель может обнаруживаться в нескольких независимо полученных гемокультурах даже между эпизодами лихорадки. При подозрении на эндокардит обычно получают три независимых набора крови из отдельных периферических венепункций до начала антибактериальной терапии; повторное выявление характерного микроорганизма подтверждает персистирующую бактериемию и используется в микробиологических критериях диагностики заболевания. Ожидать подъёма температуры или выдерживать фиксированный временной интервал между последовательными заборами для повышения чувствительности посева не требуется.  
Отрицательный посев означает, что за предусмотренный период культивирования бактериальный рост в исследованных гемокультурах не зарегистрирован. Некоторые возбудители плохо размножаются в стандартных культуральных системах или требуют специальных условий, поэтому при сохраняющемся подозрении на культурально-негативный инфекционный эндокардит применяют дополнительные серологические и молекулярно-генетические исследования для выявления микроорганизмов, которые стандартная гемокультура обнаруживает недостаточно эффективно. 
При инфекции кровотока, связанной с внутрисосудистым катетером , бактерии могут закрепляться на поверхности устройства, формировать биоплёнку и длительно сохраняться в ней, периодически поступая в циркулирующую кровь. Для проверки катетера как источника бактериемии сопоставляют гемокультуры, полученные через сосудистый доступ и из периферической вены. Выделение одного микроорганизма в обеих пробах в сочетании с более ранним появлением положительного сигнала в культуре, полученной через катетер, поддерживает катетерное происхождение инфекции и позволяет связать бактериемию с конкретным внутрисосудистым устройством.

Что влияет на результат

Антибактериальная терапия до взятия крови. После введения антибиотика количество жизнеспособных чувствительных бактерий в кровотоке уменьшается, поэтому снижается вероятность их последующего роста в культуральном флаконе. Кровь предпочтительно получать до первой дозы антибактериального препарата; при тяжёлом состоянии пациента взятие материала выполняют максимально быстро, не задерживая необходимое лечение. При нарушение асептики при венепункции бактерии нормальной микробиоты кожи могут попасть во флакон вместе с кровью и размножиться при инкубации, формируя контаминированную гемокультуру. Тщательная антисептическая обработка кожи и соблюдение техники получения материала уменьшают вероятность такого роста.