ПЦР-диагностика дерматофитов

Дерматофиты представляют собой мицелиальные кератофильные грибы, поражающие кератинсодержащие структуры человека. Они выделяют протеолитические ферменты, расщепляющие кератин, что обеспечивает рост грибов в роговом слое эпидермиса, волосах и ногтевых пластинках. Инфекции, вызываемые дерматофитами, объединяют под названием дерматофитий; к ним относятся микозы гладкой кожи, стоп, кистей, крупных складок, волосистой части головы и ногтей. ПЦР-исследование выявляет непосредственно в клиническом материале ДНК пяти клинически значимых дерматофитов. Генетическая идентификация возбудителя позволяет подтвердить дерматофитную природу поражения в пределах состава панели и установить конкретный вид или группу дерматофитов без предварительного выращивания культуры. Исследование используется при поражениях кожи, волос и ногтей, включая атипичные и рецидивирующие формы дерматофитии, а также случаи недостаточной эффективности противогрибковой терапии.

Состав исследования

• Trichophyton rubrum — антропофильный дерматофит, один из основных возбудителей микозов стоп, кистей, гладкой кожи и ногтей. Для инфекции характерны склонность к хроническому течению и последовательное вовлечение нескольких анатомических областей.
• Trichophyton mentagrophytes complex — группа близкородственных дерматофитов, способных поражать кожу, ногти и волосы. Представители комплекса различаются по источнику заражения и эпидемиологии; среди них присутствуют антропофильные и зоофильные варианты, последние чаще связаны с выраженной воспалительной реакцией.
• Trichophyton tonsurans — антропофильный дерматофит, поражающий преимущественно волосы и кожу волосистой части головы, а также гладкую кожу. Передаётся преимущественно между людьми и способен распространяться в семьях и организованных коллективах.
• Epidermophyton floccosum — антропофильный дерматофит, поражающий кожу и ногтевые пластинки без вовлечения волос. Возбудитель связан прежде всего с микозами стоп, крупных складок и гладкой кожи.
• Microsporum canis — зоофильный дерматофит, поражающий волосы и гладкую кожу. Основными источниками инфекции служат кошки и собаки; в Российской Федерации возбудитель занимает ведущие позиции среди причин дерматофитии волосистой части головы у детей.

Клиническое значение

Клинические проявления дерматофитий нередко сходны с экземой, псориазом, себорейным дерматитом и другими заболеваниями кожи, поэтому внешний вид поражения не позволяет достоверно установить его грибковую природу. Микроскопическое исследование обнаруживает грибковые элементы, однако не определяет родовую и видовую принадлежность дерматофита. Выявление специфической ДНК позволяет установить возбудителя в пределах исследуемой панели и уточнить этиологию заболевания.

При онихомикозе лабораторное подтверждение необходимо для разграничения дерматофитной инфекции и ониходистрофий другой природы. Поражение ногтей дерматофитами сопровождается изменением цвета и структуры ногтевой пластинки, подногтевым гиперкератозом, расслоением и разрушением ногтя, однако аналогичные изменения встречаются при псориазе, травматической ониходистрофии и других заболеваниях. Обнаружение ДНК дерматофита в материале ногтевой пластинки подтверждает присутствие соответствующего возбудителя и позволяет определить дерматофитную этиологию поражения в пределах спектра панели. 
При поражении волос и волосистой части головы идентификация вида помогает установить эпидемиологический характер инфекции и вероятный источник заражения. Выявление M. canis указывает на зоофильного возбудителя и требует учитывать контакт с инфицированными животными, тогда как T. tonsurans связан преимущественно с передачей между людьми. Такая информация используется для выявления источника инфекции и предупреждения её дальнейшего распространения. 
При микозах гладкой кожи, стоп, кистей и крупных складок ПЦР позволяет подтвердить дерматофитную этиологию при клинически сходных воспалительных и гиперкератотических поражениях. Видовая идентификация особенно информативна при атипичном течении, распространённом процессе, повторных эпизодах заболевания и отсутствии ожидаемого эффекта от проводимой противогрибковой терапии. 
При рецидивирующей дерматофитии или недостаточной эффективности лечения установление возбудителя помогает уточнить причину сохраняющегося инфекционного процесса и определить необходимость дальнейшего микологического обследования. Различные виды дерматофитов отличаются эпидемиологией, особенностями течения и распространённостью устойчивости к системным противогрибковым препаратам. Данное исследование идентифицирует ДНК возбудителя, но не определяет его чувствительность к антимикотическим препаратам.

Что влияет на результат

Местная и системная противогрибковая терапия уменьшает количество грибкового материала в очаге поражения и способна снижать вероятность обнаружения ДНК возбудителя. При этом ПЦР выявляет генетический материал независимо от жизнеспособности грибковых клеток, поэтому после подавления или элиминации жизнеспособного возбудителя его ДНК способна некоторое время сохраняться в исследуемом материале. Результат, полученный на фоне или после противогрибкового лечения, оценивают с учётом проводимой терапии.