Антифосфолипидные антитела в крови: IgG и IgM, дот-иммуноанализ

Исследование определяет антитела классов IgG и IgM к десяти фосфолипидам и связанным с ними белкам , участвующим в формировании антифосфолипидного аутоиммунного ответа. Для каждой антигенной мишени антитела IgG и IgM оцениваются раздельно, что позволяет получить расширенную характеристику спектра антифосфолипидной реактивности. Фосфолипиды входят в состав клеточных мембран и формируют поверхность, на которой протекают многие реакции гемостаза. Бета-2-гликопротеин и протромбин способны взаимодействовать с фосфолипидными мембранами и становиться мишенями аутоантител. При патологическом антифосфолипидном ответе взаимодействие антител с фосфолипидами, связанными с ними белками, эндотелием и тромбоцитами способствует активации свертывания крови и воспалительных механизмов. Во время беременности эти процессы могут затрагивать также трофобласт, систему комплемента и формирование плацентарного кровообращения. Стойкое присутствие клинически значимых антифосфолипидных антител связано с антифосфолипидным синдромом (АФС) , для которого характерны венозные, артериальные или микроциркуляторные тромбозы и определённые акушерские осложнения. Наиболее стандартизированное диагностическое значение имеют антитела к кардиолипину и бета-2-гликопротеину, а также волчаночный антикоагулянт. Данная панель расширяет серологическую оценку за счёт антител к другим фосфолипидным и белковым мишеням. Волчаночный антикоагулянт в состав исследования не входит и определяется отдельными коагуляционными тестами.  
Практическая задача исследования включает также установление стойкости антифосфолипидного аутоиммунного ответа . Временное появление антител возможно при инфекционных и воспалительных состояниях, поэтому для основных лабораторных маркеров АФС принципиально повторное выявление с интервалом не менее 12 недель. Качественный дот-иммуноанализ позволяет одновременно оценить широкий спектр специфичностей IgG и IgM и определить структуру аутоантительного ответа; при комплексной диагностике АФС его результаты сопоставляют с количественным исследованием антител к кардиолипину и бета-2-гликопротеину I и определением волчаночного антикоагулянта. Такое сочетание исследований позволяет оценить как расширенный спектр антифосфолипидной реактивности, так и основные лабораторные показатели, используемые в современной диагностике АФС

Состав исследования

Определяются антитела классов IgG и IgM к:

• кардиолипину;
• фосфатидной кислоте;
• фосфатидилхолину;
• фосфатидилэтаноламину;
• фосфатидилглицеролу;
• фосфатидилинозитолу;
• фосфатидилсерину;
• аннексину V;
• бета-2-гликопротеину;
• протромбину.

Клиническое значение

При венозных, артериальных и микроциркуляторных тромбозах исследование используется для выявления антифосфолипидного аутоиммунного ответа как возможного механизма приобретённой тромботической предрасположенности. Клинический спектр АФС включает тромбоз глубоких вен, тромбоэмболию лёгочной артерии, ишемический инсульт, тромбозы сосудов внутренних органов и поражение микроциркуляторного русла. Значимость серологического обследования возрастает при тромбозе в молодом возрасте, повторных эпизодах, сочетании артериальных и венозных событий, необычной локализации сосудистого поражения и отсутствии достаточного объяснения тромбоза традиционными факторами риска. Антитела к кардиолипину и бета-2-гликопротеину I составляют наиболее изученную часть данной панели и входят в основной лабораторный профиль АФС вместе с волчаночным антикоагулянтом.
При репродуктивных потерях и плацента-ассоциированных осложнениях беременности исследование применяется в составе обследования на акушерский антифосфолипидный синдром. АФС может быть связан с повторными потерями беременности, внутриутробной гибелью плода, тяжёлой преэклампсией и другими нарушениями, обусловленными патологией плаценты. Формирование акушерских осложнений связано с воздействием антифосфолипидных антител на трофобласт, эндотелий, систему комплемента и локальную регуляцию гемостаза, поэтому клиническая роль аутоантител в беременности выходит за пределы собственно тромбообразования. Современные критерии АФС рассматривают акушерские проявления как самостоятельный клинический домен, что определяет необходимость отдельной оценки репродуктивного анамнеза при интерпретации серологического профиля. 
Расширенный состав панели имеет практическое значение при сохраняющемся клиническом подозрении на АФС и неполном стандартном лабораторном профиле . Помимо антител к кардиолипину и бета-2-гликопротеину, исследование охватывает реактивность к протромбину, фосфатидилсерину, фосфатидилэтаноламину, фосфатидилинозитолу, фосфатидилхолину, фосфатидилглицеролу, фосфатидной кислоте и аннексину V. Эти специфичности изучаются как дополнительные маркеры антифосфолипидного аутоиммунного ответа и могут расширять его серологическую характеристику в случаях, когда клиническая картина предполагает АФС, а стандартные исследования дают отрицательные, пограничные или несогласованные результаты. Доказательная база для отдельных дополнительных антител неодинакова; наиболее подробно среди некритериальных маркеров изучены антитела к протромбину и особенно к комплексу фосфатидилсерин/протромбин. В данной панели антитела к фосфатидилсерину и протромбину определяются как две отдельные специфичности, поэтому результат не эквивалентен исследованию антител к комплексу фосфатидилсерин/протромбин. 
При системной красной волчанке и других системных аутоиммунных заболеваниях расширенный профиль антифосфолипидных антител имеет значение при появлении тромботических или акушерских осложнений, а также некоторых дополнительных проявлений, связанных с АФС. Современная клиническая характеристика синдрома включает наряду с макрососудистыми тромбозами и акушерской патологией микроциркуляторные нарушения, поражение клапанов сердца и гематологические изменения, прежде всего тромбоцитопению. Поэтому сочетание системного аутоиммунного заболевания с тромбозом, характерным акушерским анамнезом, необъяснимой тромбоцитопенией или определёнными клапанными изменениями служит основанием для целенаправленной оценки антифосфолипидного профиля и его сопоставления с другими признаками заболевания.

Раздельное определение IgG и IgM к каждой из десяти антигенных мишеней позволяет установить изотипический состав и широту антифосфолипидного аутоантительного ответа. Для основных антител клинический вес результата определяется их специфичностью, классом иммуноглобулинов, уровнем, сочетанием с другими антифосфолипидными маркерами и устойчивостью выявления во времени; современная оценка АФС учитывает совокупный профиль антител, поскольку различные комбинации лабораторных маркеров связаны с разной вероятностью тромботических и акушерских проявлений. IgG и IgM при этом имеют различный диагностический вес, а изолированная IgM-реактивность оценивается с учётом клинического контекста и остальных лабораторных данных.

Что влияет на результат

Острые и недавно перенесённые инфекционные и выраженные воспалительные заболевания могут сопровождаться временным появлением антифосфолипидных антител, особенно реактивности класса IgM. Поэтому впервые выявленный положительный результат в такой клинической ситуации оценивают с учётом состояния пациента и при диагностике антифосфолипидного синдрома подтверждают стойкость основных антифосфолипидных антител повторным исследованием. Введение внутривенных иммуноглобулинов, терапевтический плазмообмен и лечение, направленное на уменьшение продукции или удаление антител, могут временно изменять уровень антифосфолипидных антител в крови. При интерпретации результата следует учитывать недавнее проведение таких процедур и антитело-деплетирующей терапии. Высокая концентрация ревматоидного фактора, особенно IgM-ревматоидного фактора, выраженная гипергаммаглобулинемия и гетерофильные антитела могут вызывать неспецифическую реактивность в иммунологических методах определения антител; вероятность и выраженность этого влияния зависят от используемой тест-системы.