ПЦР типирование ВПЧ 6 и 11 типа, в урогенитальном соскобе

Определение ДНК ВПЧ 6 и 11 типов в соскобе урогенитального тракта методом ПЦР — молекулярно-биологическое исследование, выявляющее и типирующее генетический материал вируса папилломы человека (ВПЧ) типов 6 и 11 в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта. ВПЧ — безоболочечный двухцепочечный ДНК-содержащий вирус семейства Papillomaviridae. На сегодняшний день описано более 200 типов ВПЧ, из которых около 40 инфицируют аногенитальную область. Типы ВПЧ подразделяются на две клинически значимые категории: низкого онкогенного риска (прежде всего 6 и 11) и высокого онкогенного риска (прежде всего 16 и 18). Данный тест определяет именно типы низкого онкогенного риска — ВПЧ 6 и ВПЧ 11. Результат: «обнаружено» или «не обнаружено» для каждого типа.

ВПЧ является самой распространённой инфекцией, передающейся половым путём. Большинство сексуально активных людей инфицируются ВПЧ хотя бы раз в течение жизни. Вирус передаётся при прямом контакте кожа-к-коже или слизистая-к-слизистой во время половых контактов (вагинальных, анальных, орально-генитальных), а также через микроповреждения эпителия. Большинство случаев ВПЧ-инфекции (до 90%) разрешаются спонтанно в течение 1–2 лет благодаря иммунному ответу, не вызывая клинических проявлений. Однако при персистенции вируса развиваются клинически значимые поражения.

ВПЧ типов 6 и 11 являются причиной более 90% случаев аногенитальных кондилом (остроконечных кондилом, condylomata acuminata) — наиболее распространённого клинического проявления ВПЧ-инфекции. Кондиломы представляют собой доброкачественные экзофитные разрастания эпителия аногенитальной области: у женщин чаще поражаются вульва, промежность, перианальная область, влагалище; у мужчин — головка полового члена, крайняя плоть, мошонка, перианальная область. Кондиломы могут быть единичными или множественными, иметь телесный, красноватый или коричневатый цвет. Помимо аногенитальных кондилом, ВПЧ 6 и 11 являются основными причинами рецидивирующего респираторного папилломатоза (РРП) — редкого, но клинически значимого заболевания, при котором папилломы развиваются в гортани и дыхательных путях, чаще у детей (ювенильная форма) при инфицировании от матери во время родов.

Важно: типы 6 и 11 относятся к группе низкого онкогенного риска и не ассоциированы с развитием рака шейки матки, анального рака и других ВПЧ-ассоциированных злокачественных новообразований. Эти заболевания вызываются типами высокого онкогенного риска (прежде всего 16 и 18). Тем не менее в кондиломах нередко обнаруживаются коинфекции несколькими типами ВПЧ, включая типы высокого риска (до 65% кондилом у иммунокомпрометированных пациентов содержат высокоонкогенные типы), что обосновывает комплексное обследование. Диагноз аногенитальных кондилом устанавливается клинически (по характерному внешнему виду); биопсия проводится при атипичном виде, пигментации, изъязвлении или у иммунокомпрометированных пациентов.

Клиническое значение

Определение ДНК ВПЧ 6 и 11 типов методом ПЦР в соскобе урогенитального тракта применяется для лабораторного подтверждения этиологии аногенитальных кондилом, типирования вируса и дифференциальной диагностики с другими поражениями аногенитальной области.

Диагноз аногенитальных кондилом в подавляющем большинстве случаев устанавливается клинически, и рутинное ПЦР-типирование ВПЧ при типичных кондиломах, как правило, не требуется. Однако ПЦР становится клинически значимой в ряде ситуаций. При атипичных или сомнительных образованиях аногенитальной области, когда клинический дифференциальный диагноз включает контагиозный моллюск, себорейный кератоз, интраэпителиальную неоплазию или другие поражения, обнаружение ДНК ВПЧ 6 или 11 подтверждает доброкачественную природу поражения и позволяет исключить высокоонкогенные типы как основной этиологический фактор. У пациентов с ослабленным иммунитетом (ВИЧ-инфекция, после трансплантации, на иммуносупрессивной терапии) кондиломы нередко протекают атипично, склонны к рецидивированию, множественному поражению и могут содержать коинфекцию с типами высокого онкогенного риска; типирование позволяет оценить спектр присутствующих типов ВПЧ и определить тактику наблюдения. При рецидивирующих кондиломах типирование подтверждает персистенцию инфекции и может влиять на выбор тактики лечения.

ПЦР также применяется для обследования половых партнёров пациентов с аногенитальными кондиломами, для скрининга при планировании беременности (в связи с риском передачи ВПЧ 6 и 11 новорождённому во время родов и развития ювенильного респираторного папилломатоза) и в рамках комплексного обследования на инфекции, передающиеся половым путём. Обнаружение ДНК ВПЧ 6 или 11 в отсутствие клинических проявлений (латентная инфекция) свидетельствует о наличии вируса в эпителии, однако не означает, что у пациента обязательно разовьются кондиломы — в большинстве случаев инфекция разрешается спонтанно.

Таким образом, ПЦР на ВПЧ 6 и 11 типов наиболее информативна при атипичных или сомнительных аногенитальных образованиях для подтверждения этиологии, у пациентов с иммунодефицитом, при рецидивирующих кондиломах, при обследовании половых партнёров и при планировании беременности. Данный тест определяет только типы низкого онкогенного риска (6 и 11); для скрининга высокоонкогенных типов ВПЧ (16, 18 и других), ассоциированных с раком шейки матки, предназначены отдельные исследования.

Ограничения

Обнаружение ДНК ВПЧ 6 или 11 подтверждает наличие вируса в эпителии урогенитального тракта, но не является синонимом заболевания. Латентная инфекция (присутствие вируса без клинических проявлений) встречается часто и в большинстве случаев разрешается спонтанно. Положительный результат ПЦР требует соотнесения с клинической картиной. 
Отрицательный результат не исключает ВПЧ-инфекцию. Вирус может присутствовать в количестве ниже порога обнаружения тест-системы, в глубоких слоях эпителия, недоступных при стандартном заборе соскоба, или в других участках аногенитальной области, не охваченных забором материала. 
Тест определяет только типы 6 и 11 (низкий онкогенный риск). Он не предназначен для скрининга рака шейки матки или оценки онкогенного риска — для этих целей используются тесты на типы высокого онкогенного риска (16, 18, 31, 33, 45, 52, 58 и другие). 
ВПЧ-инфекция может персистировать после лечения кондилом. Исследование не предназначено для контроля эффективности лечения (удаления кондилом), поскольку вирус может сохраняться в окружающем эпителии после удаления видимых элементов.

Качество преаналитического этапа критически влияет на достоверность результата. Неправильная техника забора соскоба, недостаточное количество клеточного материала, приём противовирусных препаратов или местное применение антисептиков непосредственно перед исследованием способны привести к ложноотрицательным данным. Важно также помнить, что данный тест определяет только 6 и 11 типы ВПЧ и не заменяет скрининг на высокоонкогенные типы вируса, необходимый для профилактики рака шейки матки. Комплексная оценка результата всегда проводится лечащим врачом с учётом клинической картины, анамнеза и данных других методов обследования.