ПЦР типирование ВПЧ 16-59 типов при исследовании в рамках жидкостной цитологии

Вирус папилломы человека (ВПЧ) представляет собой ДНК-содержащий вирус, тропный к многослойному плоскому и метаплазированному эпителию. В шейке матки он проникает в базальные клетки зоны трансформации через микроповреждения слизистой, а его репликация подчинена созреванию эпителия: полноценные вирусные частицы образуются только в поверхностных дифференцированных слоях. Большинство эпизодов инфицирования протекает без симптомов и разрешается силами иммунной системы за один-два года. Клиническое значение приобретает длительная персистенция типов высокого канцерогенного риска: при ней нарастает экспрессия вирусных онкобелков E6 и E7, которые инактивируют белки p53 и Rb, снимают контроль клеточного цикла и нарушают репарацию ДНК. Накопление генетических повреждений ведёт к появлению интраэпителиальных поражений (CIN/SIL), а у части женщин к плоскоклеточному раку и аденокарциноме шейки матки. Исследуемая панель включает 12 типов (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59), отнесённых к канцерогенным для человека, причём результат выдаётся с указанием конкретного типа, а генотипы 16 и 18 выделяются отдельно. Материалом служит соскоб эпителия шейки матки и цервикального канала, помещённый в стабилизирующую жидкую среду: молекулярное типирование и цитологический препарат готовятся из одного и того же образца клеток, поэтому вирусологический и морфологический результаты характеризуют одну популяцию клеток.

Основное применение исследования «ПЦР типирование ВПЧ 16-59 типов при исследовании в рамках жидкостной цитологии» связано со скринингом и оценкой риска предраковых изменений шейки матки у женщин старше 30 лет, когда вирусологический и цитологический результаты рассматриваются совместно. Поскольку цитология выявляет уже сформировавшиеся клеточные изменения, а выявление ДНК высокоонкогенного вируса указывает на биологическую причину, способную к ним привести, сочетание двух результатов распределяет пациенток по уровню риска тяжёлой дисплазии. Обнаружение типов 16 или 18 сопряжено с наиболее высокой вероятностью CIN3 и инвазивного рака при любом состоянии цитологического препарата и служит основанием для кольпоскопического обследования даже при нормальной цитологической картине. Выявление одного из остальных десяти типов при неизменённой цитологии соответствует умеренному риску и обычно требует повторного обследования через год. Типирование помогает и при неопределённом цитологическом заключении (ASC-US): положительный результат подтверждает вирусную природу клеточных изменений и переводит пациентку в группу, нуждающуюся в кольпоскопии, отрицательный соответствует низкой вероятности значимого поражения. Отдельная информация, которую даёт именно генотипирование, состоит в различении сохранения того же самого типа при повторных исследованиях (признак персистирующей инфекции с нарастающим риском) и появления другого типа, что отражает новое инфицирование.

Интерпретация зависит от возраста и клинической ситуации. У женщин моложе 30 лет распространённость ВПЧ высока, а транзиторные инфекции преобладают, поэтому положительный результат чаще отражает недавно приобретённую инфекцию, которая разрешится самостоятельно, и решения принимаются преимущественно по цитологическим данным. Положительный результат говорит о присутствии вируса и не определяет степень поражения эпителия: глубину изменений устанавливают цитологическое заключение, кольпоскопия и гистологическое исследование. Отрицательный результат по всем 12 типам сопоставляется с низкой вероятностью тяжёлой дисплазии в ближайшие годы, что и позволяет удлинять интервалы наблюдения при нормальной цитологии. Типирование используется также после хирургического лечения CIN2+: сохранение вируса, особенно того же генотипа, ассоциировано с резидуальным или рецидивирующим поражением, тогда как отрицательный результат при нормальной цитологии соответствует благоприятному течению послеоперационного наблюдения. Вакцинация снижает распространённость типов 16 и 18, поэтому у привитых женщин доля положительных результатов смещается в сторону прочих генотипов, что учитывается при оценке риска.