ПЦР типирование 21 типов ВПЧ: 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 52, 58, 59, 26, 51, 53, 56, 66, 68, 73, 82 + КВМ в урогенитальном соскобе

Анализ выявляет ДНК вирусов папилломы человека двадцати одного типа в соскобе из урогенитального тракта методом ПЦР с типированием. Результат выдаётся для каждого типа отдельно в формате обнаружено / не обнаружено. Панель охватывает широкий спектр клинически значимых типов ВПЧ — как высокого канцерогенного риска, так и низкого риска, ассоциированных с доброкачественными аногенитальными поражениями. Типирование позволяет не только подтвердить факт инфицирования, но и конкретизировать, какие именно типы ВПЧ обнаружены, что имеет значение при комплексной клинической оценке пациента в отдельных ситуациях.

Вирус папилломы человека — безоболочечный ДНК-содержащий вирус семейства Papillomaviridae, с выраженным тропизмом к многослойному плоскому эпителию. Описано более двухсот типов ВПЧ, около сорока из которых инфицируют аногенитальную область. По онкогенному потенциалу типы ВПЧ разделяются на группу высокого риска, признанную ведущей причиной рака шейки матки и ряда других аногенитальных и орофарингеальных злокачественных новообразований, и группу низкого риска, вызывающую доброкачественные поражения без злокачественной трансформации. 
В состав данной панели входят следующие типы высокого или вероятно высокого канцерогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, а также тип 26. Среди них типы 16 и 18 имеют наибольшее клиническое значение: на них приходится до семидесяти процентов случаев рака шейки матки. Остальные типы высокого риска также участвуют в канцерогенезе, однако распределены в структуре заболеваемости неравномерно. Тип 53 в действующих классификациях занимает промежуточное положение: по данным Международного агентства по изучению рака, его канцерогенный потенциал окончательно не определён. 
Типы низкого канцерогенного риска в составе панели — 6, 11 и 44 — не вызывают рак шейки матки. Типы 6 и 11 — ведущие возбудители остроконечных кондилом: на них приходится подавляющее большинство случаев этой патологии, а также рецидивирующий респираторный папилломатоз. Тип 44 встречается реже и также ассоциирован с доброкачественными аногенитальными поражениями. Их присутствие в панели расширяет типирование, но не относится к оценке онкологического риска. 
Передача вируса происходит преимущественно половым путём при контакте со слизистыми оболочками и кожей; возможна передача от матери к ребёнку в родах. Большинство инфицированных элиминируют вирус в течение нескольких месяцев благодаря иммунному ответу; у части носителей инфекция персистирует, что составляет основу для развития клинически значимых последствий. Типы 6, 11, 16, 18 входят в состав четырёхвалентной и девятивалентной вакцин против вируса папилломы человека, а девятивалентная вакцина дополнительно охватывает типы 31, 33, 45, 52, 58.

ПЦР выявляет специфические участки генома ВПЧ — обычно консервативные фрагменты генов L1 или E6/E7 — и обеспечивает типоспецифическую идентификацию вируса. Метод не зависит от жизнеспособности возбудителя, сохраняет чувствительность при малом количестве вирусной ДНК в пробе и позволяет надёжно дифференцировать типы ВПЧ между собой.

Клиническое значение

Исследование относится к расширенному молекулярному типированию ВПЧ и применяется в клинических ситуациях, когда требуется детальная характеристика вирусной инфекции с указанием конкретных типов ВПЧ. Типичные сценарии — обследование пациенток с установленными цитологическими или гистологическими изменениями шейки матки для уточнения спектра ассоциированных типов ВПЧ; наблюдение за пациентками с персистирующей ВПЧ-инфекцией; расширенная оценка ВПЧ-статуса у пациентов из групп риска с иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, у которых частота персистенции и прогрессии ВПЧ-инфекции выше, чем в общей популяции. В отдельных клинических и научно-эпидемиологических задачах расширенное типирование используется для оценки распределения типов ВПЧ в популяции и мониторинга эффективности вакцинопрофилактики.

Отдельно следует проговорить соотношение данной панели и цервикального скрининга. Современный цервикальный скрининг строится на регуляторно-валидированных тестах на ВПЧ высокого канцерогенного риска — тест-системах, прошедших клиническую валидацию по строгим международным критериям и рекомендованных как основной инструмент скрининга рака шейки матки у женщин соответствующих возрастных групп. Данная панель, включающая наряду с высокоонкогенными типами также типы низкого канцерогенного риска, не относится к регуляторно-валидированным скрининговым тестам на рак шейки матки и не предназначена для этой задачи. Выявление низкоонкогенных типов в составе панели не имеет отношения к оценке онкологического риска, и его интерпретация в этом ключе недопустима. Для цервикального скрининга используются отдельные валидированные тесты на ВПЧ высокого риска — самостоятельно или в сочетании с цитологическим исследованием в соответствии с действующими алгоритмами.

У мужчин рутинного ВПЧ-скрининга в международных рекомендациях нет. Обследование на ВПЧ у мужчин рассматривается индивидуально в отдельных клинических ситуациях — при наличии ВПЧ-ассоциированных поражений, в отдельных группах пациентов с повышенным риском аноректальной ВПЧ-патологии, — по решению лечащего врача.

Положительный результат по отдельным типам подтверждает факт инфицирования соответствующими типами ВПЧ и даёт врачу расширенную информацию о спектре инфекции. У пациентки с установленными цервикальными поражениями эти данные учитываются в рамках общей клинической оценки наряду с результатами цитологического, кольпоскопического и при необходимости гистологического обследования. Отрицательный результат по всей панели типов высокого риска снижает вероятность их участия в клинической картине, но не заменяет валидированный скрининговый тест и не отменяет необходимость планового цервикального скрининга в соответствии с действующими рекомендациями. У пациента без клинических проявлений обнаружение любого типа ВПЧ чаще всего отражает бессимптомное носительство с высокой вероятностью спонтанной элиминации вируса и самостоятельного клинического значения не имеет.

Ограничения

Метод ПЦР выявляет ДНК вируса и не говорит о его транскрипционной активности: положительный результат подтверждает инфицирование, но не означает, что вирус биологически активен и формирует клинически значимое поражение. Большинство инфекций, включая инфекции типами высокого риска, элиминируются иммунной системой в течение одного-двух лет без развития последствий; именно поэтому клинические решения принимаются на основании совокупности данных, а не изолированного результата ВПЧ-теста. Панель не относится к регуляторно-валидированным тестам для цервикального скрининга и не должна использоваться вместо таких тестов: для задачи скрининга рака шейки матки применяются отдельные валидированные исследования на ВПЧ высокого канцерогенного риска. Панель не включает все известные типы ВПЧ высокого риска; редкие типы, не входящие в тест-систему, при их наличии не будут обнаружены. Качественный формат не даёт оценки вирусной нагрузки, и её клиническая интерпретация остаётся предметом обсуждения; стандартизированных пороговых значений нагрузки, определяющих тактику, в действующих алгоритмах нет. Однократный положительный результат не даёт информации о персистенции инфекции — клинически значимом предикторе неблагоприятного течения; для оценки персистенции проводятся повторные исследования через установленные сроки. На чувствительность метода влияет наличие крови и слизи в пробе, применение интравагинальных препаратов и антисептиков непосредственно перед забором материала, а также неоптимальная техника соскоба. Результат исследования требует интерпретации врачом — гинекологом, онкогинекологом, дерматовенерологом — с учётом клинической картины, данных цитологического и при необходимости гистологического обследования, возраста пациента и индивидуальных факторов риска, в соответствии с действующими алгоритмами ведения пациентов с ВПЧ-инфекцией.