Антинейрональные антитела (панель Hu, Yo, CV2, Ma2, Ri, амфифизин), лайн-блот

Антинейрональные антитела представляют собой группу аутоантител, направленных против внутриклеточных белков нервных клеток. Их определение в крови применяется для диагностики паранеопластических неврологических синдромов: поражений нервной системы, которые развиваются как отдалённая реакция организма на злокачественную опухоль. Панель методом лайн-блот (линейный иммуноблот) охватывает шесть наиболее изученных антител: к белкам Hu, Yo, CV2/CRMP5, Ma2, Ri и амфифизину. 
Перечисленные белки расположены внутри нервных клеток и участвуют в их нормальной работе. Антитела к ним появляются, когда опухоль за пределами нервной системы начинает производить белки, в норме характерные для нейронов: иммунная система распознаёт их как чужеродные и формирует иммунный ответ, который затрагивает и собственные нервные клетки. Важная особенность этих антител в том, что их мишени расположены внутриклеточно и недоступны для антител в живой клетке. Поэтому сами антитела, в отличие от антител к поверхностным рецепторам нейронов, не повреждают клетки напрямую: основное повреждение наносят Т-лимфоциты, а антитела служат прежде всего маркёром паранеопластического процесса и связанной с ним опухоли. Паранеопластические неврологические синдромы развиваются на фоне злокачественной опухоли, чаще всего ещё до того, как опухоль обнаружена. Неврологические нарушения обычно нарастают подостро, в течение недель или нескольких месяцев, и могут затрагивать разные отделы нервной системы: головной мозг, мозжечок, ствол мозга, спинной мозг, периферические нервы. Поскольку в основе лежит гибель нервных клеток, вызванная иммунным ответом, такие поражения часто оказываются стойкими и лишь частично обратимыми, поэтому наибольшее значение имеет своевременное выявление и лечение самой опухоли. 
Каждое антитело связано с характерным набором синдромов и определённым спектром опухолей. Антитела к Hu выявляются преимущественно при мелкоклеточном раке лёгкого и сопровождают энцефаломиелит, подострую сенсорную нейронопатию, поражение вегетативной нервной системы и ствола мозга. Антитела к Yo связаны с подострой дегенерацией мозжечка и встречаются главным образом при раке яичников и молочной железы. Антитела к CV2/CRMP5 обнаруживаются при мелкоклеточном раке лёгкого и тимоме и могут сопровождать мозжечковую атаксию, хорею, поражение зрительного нерва и периферических нервов. Антитела к Ma2 связаны с лимбическим, промежуточным и стволовым энцефалитом и характерны для опухолей яичка у молодых мужчин. Антитела к Ri сопровождают синдром опсоклонуса-миоклонуса и стволовой энцефалит и встречаются при раке молочной железы и лёгкого. Антитела к амфифизину связаны с синдромом мышечной скованности и сенсорной нейропатией и выявляются преимущественно при раке молочной железы и мелкоклеточном раке лёгкого. 
Антитела обычно присутствуют в крови уже к моменту появления неврологических симптомов и нередко обнаруживаются за месяцы до того, как выявлена опухоль. В отличие от антител к поверхностным антигенам, их уровень не используется для слежения за активностью болезни: эти антитела служат качественным маркёром, и сам факт их выявления важнее количественного значения. Для исследования используется сыворотка крови; при необходимости антитела могут определяться и в спинномозговой жидкости.

Клиническое значение 

Выявление антинейрональных антител у пациента с подходящей неврологической картиной с высокой вероятностью свидетельствует о паранеопластической природе заболевания и о наличии скрытой злокачественной опухоли. Эти антитела отличаются высокой специфичностью: их обнаружение редко бывает случайным и, как правило, требует целенаправленного поиска опухоли, даже если она пока себя не проявляет.

Тип выявленного антитела помогает предположить локализацию опухоли и направить онкологический поиск. Антитела к Hu и CV2/CRMP5 ориентируют прежде всего на мелкоклеточный рак лёгкого; антитела к Yo чаще связаны с опухолями яичников и молочной железы; антитела к Ma2 характерны для опухоли яичка у молодых мужчин; антитела к Ri и амфифизину встречаются при раке молочной железы и лёгкого. Это позволяет сфокусировать обследование, объём которого определяется типом антитела, полом и возрастом пациента.

Положительный результат по одному из онконевральных антител существенно поддерживает паранеопластическую природу неврологического синдрома, если он соответствует клинической картине и типичному спектру опухолей для данного антитела. Такой результат служит основанием для целенаправленного онкологического поиска, даже если опухоль пока не выявлена. При слабоположительном, изолированном или клинически несоответствующем результате лайн-блота требуется осторожная интерпретация и, при необходимости, подтверждение другим методом.

Лечение паранеопластических синдромов, связанных с антителами к внутриклеточным антигенам, прежде всего направлено на саму опухоль; её своевременное лечение даёт наилучшие шансы остановить прогрессирование неврологических нарушений. В отличие от заболеваний, связанных с антителами к поверхностным рецепторам, эти синдромы хуже отвечают на иммунотерапию, а уже развившиеся неврологические нарушения часто остаются стойкими. Поэтому раннее выявление антител и опухоли во многом определяет прогноз.

Результат оценивается только вместе с клинической картиной и данными обследования. Выявление антитела при отсутствии соответствующего неврологического синдрома требует осторожной трактовки и само по себе не означает паранеопластического заболевания. Окончательный диагноз устанавливается на основании сочетания неврологического синдрома, выявленного антитела и результатов поиска опухоли в соответствии с принятыми диагностическими критериями паранеопластических неврологических синдромов.

Особенности метода

Исследование выполняется методом лайн-блот (линейный иммуноблот): антитела к нескольким антигенам выявляются одновременно на тест-полоске, а результат оценивается по интенсивности окрашивания полос. Слабоположительные результаты с низкой интенсивностью полос нередко не подтверждаются при последующей проверке и могут быть ложноположительными, тогда как выраженное окрашивание более надёжно. Поэтому при слабоположительном или изолированном результате, не соответствующем клинической картине, рекомендуется подтверждение другим методом, например исследованием на тканевых срезах. 
Отрицательный результат не исключает паранеопластического неврологического синдрома. Панель охватывает наиболее частые антитела к внутриклеточным антигенам, однако существуют и другие антинейрональные антитела, не входящие в её состав, а часть паранеопластических синдромов протекает без выявляемых антител. Кроме того, при некоторых формах поражения нервной системы значимы антитела к поверхностным антигенам нейронов, которые определяются отдельными исследованиями. 
Результат носит качественный характер: он отражает наличие или отсутствие антител, но не тяжесть неврологического поражения и не стадию опухоли. Диагностическую значимость он приобретает только в сочетании с неврологическим синдромом и данными онкологического обследования, поэтому интерпретируется лечащим врачом в общем клиническом контексте, а не как изолированный лабораторный показатель.