Для врача 
Определение микросателлитной нестабильности (MSI)
Информация об исследовании
Микросателлиты представляют собой короткие повторяющиеся последовательности ДНК, которые в норме сохраняют свою длину благодаря системе репарации неспаренных оснований (MMR). При нарушении работы этой системы в процессе деления клеток накапливаются ошибки, и длина микросателлитных повторов меняется. Такое состояние называют микросателлитной нестабильностью. Сбои характерны для опухолей с дефектной системой репарации, что может быть обусловлено как наследственными мутациями (синдром Линча), так и приобретёнными нарушениями. В отличие от наследственных форм, спорадические опухоли с MSI возникают чаще всего из-за гиперметилирования промотора гена MLH1 и составляют около 10–15% всех случаев колоректального рака. Определение MSI-статуса в ткани опухоли имеет прямое клиническое значение: оно позволяет прогнозировать эффективность иммунотерапии, оценивать прогноз заболевания и заподозрить наследственный рак. Исследование проводят на опухолевом материале, полученном при биопсии или хирургическом удалении новообразования.
Клиническое значение
Микросателлитная нестабильность является молекулярным маркёром, который помогает решать несколько клинических задач. Наиболее важная его роль сегодня: отбор пациентов для иммунотерапии. Опухоли с высоким уровнем микросателлитной нестабильности (MSI-H) несут большое количество соматических мутаций, что делает их особенно чувствительными к ингибиторам контрольных точек иммунного ответа (пембролизумаб, ниволумаб). Согласно рекомендациям RUSSCO, при наличии MSI-H у пациентов с метастатическим колоректальным раком показана иммунотерапия. FDA одобрило опухоле-независимое применение пембролизумаба при нерезектабельных или метастатических солидных опухолях с MSI-H/dMMR в рамках установленных показаний. Поэтому определение MSI является обязательным при выборе тактики лечения у пациентов с метастатическим КРР и рекомендуется при распространённых формах рака эндометрия, желудка и других локализациях, где возможна иммунотерапия.
MSI-статус также помогает заподозрить синдром Линча, наследственную предрасположенность к колоректальному раку, раку эндометрия и другим опухолям. Выявление MSI-H у пациента молодого возраста, при наличии семейного анамнеза или множественных первичных опухолей служит основанием для направления на генетическое консультирование и поиск герминальных мутаций. Однако важно понимать: не все MSI-позитивные опухоли наследственные. Результат теста не является самостоятельным диагнозом синдрома Линча, но служит важным ориентиром для дальнейшего обследования. При подозрении на наследственную форму дополнительно проводят иммуногистохимическое исследование белков MMR для выявления утраты экспрессии конкретного гена.
Прогностическое значение MSI-статуса зависит от стадии заболевания. При колоректальном раке II стадии MSI-позитивность ассоциирована с более благоприятным прогнозом и может влиять на решение об адъювантной химиотерапии фторпиримидинами. При III стадии это преимущество менее выражено. При раке желудка, эндометрия и других локализациях прогностическая роль MSI изучена хуже.
Интерпретация MSI-статуса всегда требует сопоставления с клинико-морфологическими данными. Положительный результат (MSI-H) указывает на высокую вероятность дефекта системы репарации и может служить основанием для рассмотрения иммунотерапии с учётом локализации, стадии заболевания и зарегистрированных показаний. При метастатическом колоректальном раке статус MSS указывает на низкую вероятность эффективности монотерапии ингибиторами контрольных точек, если других показаний к её применению нет. Поэтому результат теста всегда оценивают в контексте стадии заболевания, локализации опухоли, возраста пациента и других прогностических факторов.
Что влияет на результат анализа
На определение микросателлитной нестабильности влияет качество опухолевого материала. Для анализа необходима ткань с достаточным содержанием опухолевых клеток: менее 20–30% опухолевого компонента может привести к ложноотрицательному результату. При сомнительном результате может потребоваться повторное исследование на другом участке опухоли. Способ фиксации материала также имеет значение: длительное хранение в формалине или неправильная обработка могут повреждать ДНК и искажать результат. Предшествующее лечение (химиотерапия или лучевая терапия) в большинстве случаев не изменяет MSI-статус, который определяется герминальными или ранними соматическими нарушениями. Для динамического наблюдения MSI не используется, так как этот маркёр стабилен в процессе прогрессии опухоли.
Когда назначают анализ
- Колоректальный рак: определение MSI-статуса для оценки возможности применения ингибиторов контрольных точек иммунного ответа, уточнения прогноза и выявления опухолей, требующих дальнейшего обследования на синдром Линча.
- Рак эндометрия, аденокарцинома желудка и пищеводно-желудочного перехода, рак тонкой кишки: оценка MSI/MMR-статуса при рассмотрении иммунотерапии.
- Другие солидные опухоли, при которых рассматривается назначение ингибиторов контрольных точек иммунного ответа, при условии, что метод определения MSI валидирован для соответствующей локализации.
- Подозрение на синдром Линча при раннем возрасте развития опухоли, отягощённом семейном анамнезе или наличии нескольких первичных опухолей, относящихся к спектру синдрома Линча.
- Необходимость уточнить MMR/MSI-статус при сомнительных или противоречивых результатах иммуногистохимического исследования белков системы репарации неспаренных оснований.
Как подготовиться к анализу
Вопросы и ответы
Микросателлитная нестабильность (MSI) — это молекулярный феномен, при котором в опухолевой ткани изменяется длина коротких повторяющихся последовательностей ДНК (микросателлитов) вследствие дефекта системы репарации неспаренных оснований (MMR). Определение MSI применяется в онкологии для молекулярной характеристики опухолей толстой кишки, эндометрия, желудка и ряда других локализаций. Статус MSI используется при оценке наследственной предрасположенности (синдром Линча), прогноза и потенциальной чувствительности к отдельным видам противоопухолевой терапии.
MSI-статус чаще всего исследуется при колоректальном раке и раке эндометрия, где частота микросателлитной нестабильности наиболее высока. Анализ также проводится при опухолях желудка, тонкой кишки, мочевыводящих путей, яичников и других новообразованиях, входящих в спектр синдрома Линча. Выбор опухолевой локализации для тестирования и интерпретация полученного MSI-статуса в контексте конкретного клинического случая относятся к компетенции онколога и врача-патологоанатома, опирающихся на гистологическую картину и семейный анамнез.
Микросателлитная нестабильность служит молекулярным признаком, совместимым с дефектом системы репарации MMR, который лежит в основе синдрома Линча — наследственного неполипозного колоректального рака. Выявление MSI-high в опухолевой ткани поддерживает дальнейшее обследование на наличие герминальных мутаций в генах MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 и EPCAM. При этом MSI не служит самостоятельным критерием диагноза синдрома Линча: окончательное подтверждение требует молекулярно-генетического исследования крови и оценки клинико-анамнестических данных медицинским генетиком.
Для определения микросателлитной нестабильности используется опухолевая ткань, как правило, фиксированная в формалине и залитая в парафин (FFPE-блок), полученная при биопсии или хирургическом удалении новообразования. Для сравнительного анализа ряд методик требует также образца нормальной ткани того же пациента. Адекватность материала, доля опухолевых клеток и сохранность ДНК оцениваются врачом-патологоанатомом и влияют на возможность корректного выполнения исследования и интерпретации MSI-статуса.
Определение MSI и иммуногистохимическое исследование белков системы MMR (MLH1, MSH2, MSH6, PMS2) — два взаимодополняющих подхода к оценке статуса репарации неспаренных оснований. MSI-тестирование выявляет молекулярные изменения длины микросателлитных повторов в ДНК, тогда как иммуногистохимия оценивает наличие или утрату экспрессии соответствующих белков в ткани опухоли. Результаты этих методов обычно согласуются, и их совместное применение повышает информативность диагностического алгоритма при подозрении на синдром Линча и при характеристике опухолей.
Результат MSI-high отражает выраженную микросателлитную нестабильность в исследованных локусах опухолевой ДНК и совместим с дефектом системы репарации MMR. Такой статус встречается при опухолях, ассоциированных с синдромом Линча, а также при спорадических новообразованиях, чаще связанных с метилированием промотора гена MLH1. Клиническое значение результата MSI-high — прогностическое, предиктивное в отношении отдельных видов иммунотерапии и показание к дальнейшему обследованию на наследственный синдром — определяется онкологом и медицинским генетиком с учётом всей клинической картины.
Стоимость исследования
биоматериала 0 ₽