ПЦР-диагностика хламидии трахоматис (Chlamydia trachomatis) в мазках ротоглотки

Анализ выявляет ДНК Chlamydia trachomatis в мазках со слизистой оболочки ротоглотки методом ПЦР. Результат выдаётся в формате обнаружено / не обнаружено. Исследование применяется для диагностики фарингеальной хламидийной инфекции — внегенитальной локализации возбудителя, клинически значимой в отдельных клинических и эпидемиологических ситуациях. Материалом служит мазок с поверхности миндалин, нёбных дужек и задней стенки глотки.

C. trachomatis — облигатный внутриклеточный патоген, размножающийся в эпителиальных клетках слизистых оболочек. Цикл развития включает инфекционное элементарное тельце и репликативное ретикулярное тельце, находящееся внутри цитоплазматической вакуоли поражённой клетки; внутриклеточная локализация определяет спектр активных препаратов — макролиды, тетрациклины, фторхинолоны. Серовары D–K вызывают урогенитальный хламидиоз и могут поражать другие слизистые оболочки при непосредственном контакте, включая конъюнктиву новорождённых в родах и слизистую ротоглотки при орогенитальных контактах у сексуально активных взрослых. Серовары L1–L3 вызывают венерическую лимфогранулёму, серовары A, B, Ba, C — трахому; эти формы имеют иной эпидемиологический и клинический профиль и к типичным внегенитальным локализациям у сексуально активных взрослых в развитых странах отношения не имеют. 
Фарингеальная C. trachomatis-инфекция в подавляющем большинстве случаев протекает бессимптомно. В отличие от урогенитальной формы, она редко вызывает самостоятельную клинически выраженную картину фарингита; возможные проявления — неспецифические ощущения в горле, лёгкая гиперемия слизистой — сами по себе не позволяют заподозрить хламидийную этиологию. Именно поэтому фарингеальная хламидийная инфекция диагностируется только при целенаправленном лабораторном обследовании; без него возбудитель остаётся нераспознанным. Клиническое значение выявления такой инфекции определяется прежде всего эпидемиологически: инфицированный пациент служит источником передачи возбудителя половому партнёру при орогенитальных контактах, и эрадикация возбудителя у носителя прерывает эту цепочку. 
Лабораторная диагностика C. trachomatis во всех локализациях строится преимущественно на молекулярных методах. Культуральное исследование требует специальных условий и в рутинной практике не применяется; антигенные и серологические тесты для диагностики фарингеальной локализации информативны ограниченно. ПЦР признана основным методом выявления возбудителя в ротоглоточном материале: метод не зависит от жизнеспособности хламидий, сохраняет чувствительность при малом количестве возбудителя и не требует особых условий транспортировки.

ПЦР выявляет специфические участки генома C. trachomatis — чаще всего фрагменты криптической плазмиды или гена ompA — и обеспечивает прямое выявление возбудителя в ротоглоточном мазке. Криптическая плазмида присутствует в нескольких копиях на бактериальную клетку, что обеспечивает более высокую аналитическую чувствительность по сравнению с одно­копийными генными мишенями.

Клиническое значение

Исследование применяется при целенаправленном обследовании пациентов, имеющих эпидемиологические предпосылки для фарингеальной хламидийной инфекции: у пациентов любого пола с анамнезом орогенитальных контактов с партнёром, у которого установлена или предполагается хламидийная инфекция; у пациентов с установленной урогенитальной или аноректальной C. trachomatis-инфекцией — для выявления сопутствующей фарингеальной локализации и полной санации всех очагов; при обследовании половых партнёров пациентов с хламидиозом. У мужчин, практикующих секс с мужчинами, фарингеальное тестирование на C. trachomatis рассматривается индивидуально в рамках общей оценки риска, с пониманием того, что самостоятельная клиническая значимость фарингеальной хламидии для носителя ниже, чем у других локализаций, а основное обоснование её выявления — эпидемиологическое. Рутинный скрининг пациентов вне групп риска на фарингеальную C. trachomatis-инфекцию не рекомендован.

Отдельная клиническая задача — дифференциальная диагностика затяжного или атипично протекающего фарингита у пациентов с эпидемиологическими факторами риска, когда в дифференциально-диагностический ряд возможных возбудителей включается C. trachomatis.

Положительный результат подтверждает наличие фарингеальной хламидийной инфекции и является основанием для назначения антибактериальной терапии препаратами, активными в отношении внутриклеточных возбудителей, — доксициклином или азитромицином по клинической ситуации. Одновременно проводится обследование половых партнёров и тестирование на сопутствующие инфекции, передающиеся половым путём, — прежде всего на N. gonorrhoeae и ВИЧ, а также исследование других возможных локализаций C. trachomatis: урогенитального тракта, прямой кишки. Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии возбудителя в исследованном биоматериале на момент обследования; при сохраняющемся клиническом или эпидемиологическом подозрении исследование может повторяться с учётом возможного инкубационного периода.

Ограничения

Метод ПЦР выявляет ДНК возбудителя и не говорит о его жизнеспособности: при контрольном исследовании в короткие сроки после завершения терапии возможен ложноположительный результат за счёт остаточной ДНК уже элиминированных хламидий, поэтому оценка эффективности лечения молекулярным методом выполняется не ранее чем через три-четыре недели после завершения курса терапии. Отрицательный результат не исключает инфекцию полностью: при раннем обследовании в пределах инкубационного периода концентрация возбудителя в пробе может быть недостаточной для его выявления, а исследование ротоглотки не охватывает другие возможные локализации C. trachomatis — урогенитальный тракт и прямую кишку, — которые у пациентов с эпидемиологическими факторами риска требуют отдельного тестирования. На чувствительность метода влияет предшествующая системная антибактериальная терапия, снижающая количество возбудителя в пробе; местное применение антисептиков в области ротоглотки и приём леденцов и пастилок непосредственно перед забором материала могут дополнительно снижать чувствительность исследования. Тест не различает серовары C. trachomatis и не дифференцирует хламидийную инфекцию сероваров D–K от венерической лимфогранулёмы, вызываемой L1–L3; при клинических признаках лимфогранулёмы выполняется отдельное молекулярно-генетическое типирование возбудителя. ПЦР не определяет чувствительность хламидий к антибактериальным препаратам; такая оценка в рутинной клинической практике не проводится. Результат исследования требует интерпретации врачом — дерматовенерологом, инфекционистом, оториноларингологом — с учётом клинической картины, данных полового анамнеза, результатов обследования других возможных локализаций инфекции и эпидемиологического контекста.