ПЦР-диагностика боррелии (Вorrelia burgdorferi) в синовиальной жидкости

Анализ выявляет ДНК боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato — возбудителей клещевого боррелиоза (болезни Лайма) — в синовиальной жидкости методом ПЦР. Биоматериал — синовиальная жидкость, получаемая при пункции сустава по клиническим показаниям. Результат выдаётся в формате обнаружено / не обнаружено.

Лайм-артрит — одна из форм поздней стадии боррелиоза, развивающаяся через месяцы или годы после инфицирования у нелеченых или недостаточно леченых пациентов. Инфекция чаще даёт олиго- или моноартрит крупных суставов, прежде всего коленного, с эпизодами выраженного отёка и болезненности, часто с длительной ремиссией между обострениями. Эта клиническая картина, возникающая у пациента с эпидемиологическим анамнезом, заставляет включить боррелиоз в дифференциальный поиск причин артрита. 
Диагностика Лайм-артрита строится прежде всего на серологии. На стадии артрита иммунный ответ к боррелиям обычно хорошо сформирован, и серологические тесты (ИФА с подтверждением иммуноблотом) дают надёжный ответ. Положительная серология у пациента с типичным артритом крупных суставов — основной лабораторный аргумент в пользу диагноза. Молекулярные методы — исследование синовиальной жидкости методом ПЦР — играют дополнительную роль и используются в специфических ситуациях. 
Клиническая ценность ПЦР синовиальной жидкости при Лайм-артрите связана с тем, что боррелии в полости сустава могут сохраняться, и их ДНК выявляется у значительной части пациентов. Синовиальная жидкость относится к биоматериалам с относительно высокой чувствительностью ПЦР при поздних формах боррелиоза — заметно выше, чем у крови или ликвора на этой стадии. Метод даёт прямое подтверждение присутствия возбудителя в очаге воспаления — там, где иммунологические данные показывают только реакцию организма на инфекцию. 
Тем не менее ПЦР не заменяет серологии. Метод имеет умеренные ограничения по чувствительности: отрицательный результат не исключает Лайм-артрит, особенно у пациентов, уже получавших антибактериальную терапию. Положительный результат даёт прямое этиологическое подтверждение и наиболее ценен у серопозитивного пациента с клинической картиной Лайм-артрита, когда требуется прямое подтверждение присутствия ДНК боррелий в суставном материале — например, для разграничения активной инфекции и иммуноопосредованного воспаления, для подтверждения этиологии у пациента с артритом, не отвечающим на стандартную терапию, в сложных клинических ситуациях.

Метод ПЦР выявляет специфические участки генома Borrelia burgdorferi sensu lato в синовиальной жидкости. Метод не зависит от жизнеспособности возбудителя и сохраняет аналитическую чувствительность при низком количестве боррелий в пробе. Тест выявляет несколько клинически значимых геновидов комплекса B. burgdorferi sensu lato — B. burgdorferi sensu stricto, B. afzelii, B. garinii — без раздельной идентификации; для эпидемиологических задач, требующих видовой дифференциации, используются отдельные исследования.

Клиническое значение

Тест применяется при дифференциальной диагностике артритов у пациентов с эпидемиологическим анамнезом — присасывание клеща в анамнезе, проживание или поездки в эндемичных регионах, ранее перенесённый боррелиоз. Он особенно полезен при олиго- или моноартрите крупных суставов (чаще коленного) с эпизодическим течением — клинической картине, типичной для Лайм-артрита.

Серологическое обследование на боррелии остаётся основным лабораторным инструментом диагностики на этой стадии заболевания. ПЦР синовиальной жидкости дополняет серологию у серопозитивного пациента с клинической картиной Лайм-артрита, когда требуется прямое подтверждение присутствия возбудителя в суставном материале — при сомнениях в активности инфекции, при артрите, не отвечающем на стандартную антибактериальную терапию, в сложных клинических ситуациях.

Положительный результат подтверждает присутствие ДНК боррелий в полости сустава и поддерживает диагноз Лайм-артрита у пациента с соответствующей клинической и серологической картиной. Тактика определяется лечащим врачом — ревматологом, инфекционистом, ортопедом — в соответствии с действующими рекомендациями по ведению поздних форм боррелиоза.

Отрицательный результат не исключает Лайм-артрит. Боррелии могут отсутствовать в конкретной пробе синовиальной жидкости при истинной инфекции. На результат особенно влияет предшествующая антибактериальная терапия, после которой ДНК возбудителя в синовиальной жидкости может уже не выявляться, а клинические признаки артрита сохраняются за счёт иммуноопосредованных механизмов воспаления. У пациента с типичной картиной Лайм-артрита и положительной серологией отрицательный результат ПЦР синовиальной жидкости не отменяет диагноз, и тактика определяется по клиническим и серологическим данным. При отрицательном результате и сохраняющихся сомнениях в этиологии диагностический поиск продолжается с учётом других возможных причин артрита — реактивного, ревматоидного, кристаллических артропатий, инфекций другой этиологии.

Ограничения

Метод ПЦР выявляет ДНК возбудителя и не говорит о его жизнеспособности. Отрицательный результат исследования синовиальной жидкости не исключает Лайм-артрит. Тест не заменяет серологического обследования, остающегося основным лабораторным инструментом диагностики поздних форм боррелиоза. На чувствительность метода существенно влияет предшествующая антибактериальная терапия. Тест выявляет геновиды комплекса B. burgdorferi sensu lato без их раздельной идентификации; для видовой дифференциации выполняется отдельное исследование. ПЦР синовиальной жидкости не выявляет другие возможные причины артрита — ревматоидный артрит, реактивные артриты, кристаллические артропатии, инфекции другой этиологии — для их диагностики применяются соответствующие методы. Артроцентез — инвазивная процедура, выполняемая по клиническим показаниям квалифицированным специалистом. Результат исследования требует интерпретации врачом — ревматологом, инфекционистом, ортопедом — с учётом клинической картины, серологических данных, эпидемиологического анамнеза и общей ситуации.