ПЦР-диагностика вируса герпеса 8 типа (HHV8) в ликворе

Исследование направлено на выявление ДНК вируса герпеса 8 типа в спинномозговой жидкости (ликворе). Результат выдаётся в формате «обнаружено» или «не обнаружено». ПЦР выявляет ДНК HHV-8 непосредственно в ликворе. Обнаружение вирусной ДНК в спинномозговой жидкости указывает на присутствие вируса в пределах центральной нервной системы, что может свидетельствовать о лептоменингеальном распространении HHV-8-ассоциированного лимфопролиферативного заболевания или о системной виремии с проникновением вируса через гематоэнцефалический барьер. В отличие от HHV-6, для которого ЦНС является типичным местом латенции и реактивации, HHV-8 не обладает первичным нейротропизмом, и обнаружение его ДНК в ликворе — событие нечастое, почти всегда ассоциированное с тяжёлой иммуносупрессией и HHV-8-ассоциированными злокачественными новообразованиями. Серологические методы при HHV-8 не позволяют оценить вовлечение ЦНС.
Вирус герпеса человека 8 типа (HHV-8), также известный как герпесвирус, ассоциированный с саркомой Капоши (KSHV), поражает преимущественно B-лимфоциты и эндотелиальные клетки. После заражения вирус устанавливает пожизненную латентную инфекцию. У большинства инфицированных он остаётся клинически «молчащим». HHV-8 является доказанной причиной саркомы Капоши, первичной выпотной лимфомы (PEL) и мультицентрической болезни Кастлемана (MCD). Все три заболевания развиваются преимущественно у иммунокомпрометированных лиц, хотя отдельные формы саркомы Капоши описаны и без выраженного иммунодефицита.

Клиническое значение

Исследование ликвора на ДНК HHV-8 не является рутинным тестом и назначается в узком круге клинических ситуаций, когда необходимо оценить возможное вовлечение ЦНС при установленном или подозреваемом HHV-8-ассоциированном заболевании.

Наиболее значимым показанием является подозрение на лептоменингеальное распространение первичной выпотной лимфомы. PEL — агрессивная B-клеточная лимфома, которая классически проявляется выпотами в плевральную, перикардиальную или перитонеальную полости без формирования солидных опухолевых масс. В редких случаях опухолевые клетки обнаруживаются в ликворе, что свидетельствует о лептоменингеальном вовлечении. Пациенты с лептоменингеальной PEL могут предъявлять жалобы на головную боль, тошноту, нарушение зрения, парезы черепных нервов, нарастающую спутанность сознания. Обнаружение ДНК HHV-8 в ликворе у пациента с PEL или с подозрением на неё является высокоспецифичным маркёром лептоменингеального вовлечения и может использоваться не только для диагностики, но и для мониторинга ответа на терапию, направленную в ликворное пространство. Диагноз лептоменингеальной PEL подтверждается цитологическим исследованием ликвора с обнаружением атипичных плазмобластных клеток и иммуногистохимическим окрашиванием на LANA (латентный ядерный антиген HHV-8).

У пациентов с ВИЧ-инфекцией и неврологической симптоматикой обнаружение ДНК HHV-8 в ликворе может указывать на несколько процессов. Помимо лептоменингеальной PEL, в дифференциальную диагностику входят первичная лимфома ЦНС (которая, в отличие от системных лимфом, почти всегда ассоциирована с вирусом Эпштейна-Барр, а не с HHV-8), проявления мультицентрической болезни Кастлемана с вовлечением ЦНС и KSHV-ассоциированный воспалительный цитокиновый синдром (KICS) с неврологическими проявлениями. Положительный результат ПЦР ликвора на HHV-8 у ВИЧ-инфицированного пациента с неврологической симптоматикой обосновывает целенаправленный диагностический поиск HHV-8-ассоциированных заболеваний ЦНС, но не является достаточным для установления конкретного диагноза без цитологического, иммуногистохимического и нейровизуализационного подтверждения.

У реципиентов трансплантатов HHV-8-ассоциированные лимфопролиферативные осложнения с вовлечением ЦНС встречаются крайне редко, но описаны. Обнаружение ДНК HHV-8 в ликворе у трансплантированного пациента с неврологическими проявлениями, особенно при наличии известной HHV-8-серопозитивности или анамнеза посттрансплантационной саркомы Капоши, требует исключения лимфопролиферативного поражения ЦНС.

Исследование не предназначено для рутинного скрининга при стандартном обследовании ликвора, для диагностики саркомы Капоши без неврологической симптоматики или для оценки системной виремии HHV-8 (для этого исследуется кровь).

Ограничения метода

Положительный результат подтверждает присутствие ДНК HHV-8 в ликворе, однако не устанавливает конкретный диагноз. Вирусная ДНК в ликворе может отражать лептоменингеальное распространение PEL, системную виремию с проникновением вируса в ликвор или присутствие латентно инфицированных лимфоцитов в спинномозговой жидкости. Для уточнения диагноза необходимы цитологическое исследование ликвора, иммуногистохимическое окрашивание, нейровизуализация и параллельное определение ДНК HHV-8 в крови.
Отрицательный результат не полностью исключает HHV-8-ассоциированное поражение ЦНС. Количество вирусной ДНК в ликворе может быть ниже порога чувствительности метода, особенно на ранних стадиях лептоменингеального вовлечения. При сохраняющемся клиническом подозрении рекомендуется повторное исследование.
Качественный формат фиксирует наличие или отсутствие ДНК, но не определяет вирусную нагрузку. Для мониторинга лептоменингеальной PEL и оценки ответа на терапию более информативно количественное определение ДНК HHV-8 в ликворе.
Результат ПЦР ликвора следует интерпретировать совместно с неврологической симптоматикой, данными МРТ головного мозга, цитологией ликвора, результатами ПЦР крови и иммунным статусом пациента. Интерпретацию проводит лечащий врач (невролог, онколог, гематолог, инфекционист, трансплантолог).