ПЦР-диагностика вируса герпеса 6 типа (HHV6) в сыворотке крови

Это исследование позволяет определить, присутствует ли в сыворотке крови ДНК вируса герпеса 6 типа. HHV-6 — один из самых распространённых герпесвирусов: к двум годам жизни им инфицировано более 90% населения. Результат выдаётся в формате «обнаружено» или «не обнаружено».
ПЦР выявляет ДНК HHV-6 в сыворотке крови — бесклеточной фракции, содержащей внеклеточную вирусную ДНК. Это отличает данный тест от исследования цельной крови, где определяется суммарная ДНК — как внеклеточная, так и содержащаяся внутри инфицированных клеток. Исследование сыворотки может лучше отражать активный процесс, чем исследование цельной крови, где результат может искажаться присутствием латентно инфицированных клеток. Однако и положительный результат в сыворотке не является безусловным доказательством клинически значимой инфекции и требует сопоставления с симптоматикой и иммунным статусом. Серологические методы при HHV-6 неинформативны для диагностики активной инфекции, поскольку антитела к этому вирусу есть практически у всех взрослых.
Вирус герпеса человека 6 типа (HHV-6) существует в виде двух самостоятельных видов — HHV-6A и HHV-6B. HHV-6B является возбудителем внезапной экзантемы (розеолы) — распространённого детского заболевания, проявляющегося высокой лихорадкой в течение трёх-пяти дней с последующим появлением пятнистой сыпи на туловище при нормализации температуры. У подавляющего большинства детей болезнь проходит самостоятельно и без последствий. HHV-6A изучен хуже и чаще обнаруживается у иммунокомпрометированных пациентов. Оба вида поражают преимущественно T-лимфоциты и после первичного заражения устанавливают пожизненную латентную инфекцию. У здоровых людей вирус периодически реактивируется бессимптомно — его ДНК обнаруживается в слюне у большинства взрослых, что не имеет клинического значения.
Особенностью HHV-6, отличающей его от других герпесвирусов, является способность к хромосомной интеграции: примерно у 1% населения вирусный геном встроен в хромосомы каждой клетки организма и передаётся потомству по наследству. Это состояние (ciHHV-6) не является активной инфекцией. В сыворотке крови у лиц с ciHHV-6 вирусная ДНК определяется реже и в более низких концентрациях, чем в цельной крови, однако полностью исключить её обнаружение нельзя, что сохраняет риск ложноположительной интерпретации.

Клиническое значение

У здоровых взрослых и детей с типичной розеолой лабораторное подтверждение HHV-6 обычно не требуется — диагноз устанавливается клинически. Исследование сыворотки крови на ДНК HHV-6 приобретает значение в ситуациях, когда активная инфекция или реактивация вируса может вызвать серьёзные осложнения, прежде всего у иммунокомпрометированных пациентов.

Наибольшее клиническое значение тест имеет у реципиентов трансплантатов гемопоэтических стволовых клеток и солидных органов. Реактивация HHV-6 после трансплантации наблюдается у 30–50% реципиентов и может проявляться лихорадкой, сыпью, гепатитом, пневмонитом, подавлением костномозгового кроветворения и, наиболее грозно, лимбическим энцефалитом — поражением височных долей головного мозга с нарушением памяти, спутанностью сознания и судорогами. Энцефалит, ассоциированный с HHV-6B, особенно характерен для реципиентов пуповинной крови и сопровождается высокой летальностью и частыми стойкими неврологическими последствиями. Обнаружение ДНК HHV-6 в сыворотке крови у трансплантированного пациента с соответствующей клинической картиной поддерживает диагноз реактивации и обосновывает дальнейшее обследование. При этом для подтверждения энцефалита необходимо исследование спинномозговой жидкости.

У иммунокомпрометированных пациентов других групп — людей, живущих с ВИЧ-инфекцией при выраженной иммуносупрессии, пациентов на длительной иммуносупрессивной терапии по поводу аутоиммунных заболеваний или онкологических процессов — реактивация HHV-6 может приводить к поражению центральной нервной системы, лёгких и печени. В этих группах обнаружение ДНК вируса в сыворотке крови в сочетании с клиническими признаками (лихорадка неясного генеза, неврологическая симптоматика, гепатит, пневмонит) обосновывает целенаправленный диагностический поиск. Изолированная находка ДНК HHV-6 в сыворотке крови без соответствующей клиники не является основанием для постановки диагноза, поскольку бессимптомная реактивация в условиях иммуносупрессии наблюдается часто.

Тест может также рассматриваться при обследовании детей раннего возраста с атипичными лихорадочными состояниями или судорогами, когда клиническая картина не позволяет уверенно установить диагноз розеолы. Во всех случаях положительный результат ПЦР не является синонимом клинически значимой инфекции и должен оцениваться в контексте симптоматики, иммунного статуса и результатов дополнительных исследований.

Рутинный скрининг бессимптомных лиц не показан. Серологическое определение антител к HHV-6 при практически всеобщей инфицированности населения не имеет диагностической ценности для выявления активной инфекции.

Ограничения метода

Положительный результат ПЦР в сыворотке крови подтверждает присутствие внеклеточной ДНК HHV-6, но не является безусловным доказательством клинически значимой инфекции. Хотя сыворотка может лучше отражать активную репликацию, чем цельная кровь, бессимптомная реактивация и минимальное присутствие ДНК при хромосомной интеграции (ciHHV-6) могут давать положительный результат.
При повторном выявлении ДНК HHV-6 в сыворотке крови без убедительной клинической картины активной инфекции следует учитывать возможность хромосомной интеграции вируса (ciHHV-6). Это состояние не является реактивацией, но может имитировать виремию и приводить к стойко положительным результатам ПЦР. Подозрение на ciHHV-6 особенно важно при несоответствии между лабораторным результатом и клинической картиной, а также при стабильном повторном выявлении вирусной ДНК. В таких случаях для уточнения природы положительного результата могут потребоваться дополнительные методы, прежде всего количественная ПЦР и исследование других материалов по решению врача.
Отрицательный результат не исключает HHV-6-инфекцию. Вирус может реплицироваться в тканях (головной мозг, лёгкие, печень) без определяемого уровня ДНК в сыворотке крови. При подозрении на энцефалит необходимо исследование спинномозговой жидкости.
Качественный формат теста фиксирует наличие или отсутствие ДНК, но не определяет вирусную нагрузку. Для мониторинга реактивации у трансплантированных пациентов может потребоваться количественное исследование.
Результат ПЦР следует интерпретировать совместно с клинической картиной, иммунным статусом и данными дополнительных исследований. Интерпретацию проводит лечащий врач (инфекционист, гематолог, трансплантолог, невролог, педиатр)