ПЦР-диагностика вируса Эпштейна-Барр (EBV) в носоглотке

Исследование направлено на обнаружение вируса Эпштейна-Барр в отделяемом слизистой оболочки носоглотки. Тест выявляет наличие или отсутствие вирусной ДНК в материале и не оценивает её количество. Методом ПЦР вирусная ДНК определяется в клеточном материале, полученном при мазке со слизистой носоглотки. Носоглотка — клинически значимая локализация для исследования на вирус Эпштейна-Барр: именно эпителий носоглотки является местом, где вирус размножается после первичного заражения, а также зоной, в которой развивается редкая, но важная злокачественная опухоль — назофарингеальная карцинома, практически всегда ассоциированная с этим вирусом. В отличие от ротоглотки, где вирусовыделение у здоровых носителей встречается часто и снижает информативность качественного теста, в носоглотке фоновая частота обнаружения вируса у людей без патологии ниже. Это повышает диагностическое значение исследования, особенно в онкологическом контексте.

Вирус Эпштейна-Барр (EBV, HHV-4) — гамма-герпесвирус, распространённый в человеческой популяции повсеместно: к 18–25 годам доля людей с антителами к вирусу в крови достигает 90–95%. После первичной инфекции вирус пожизненно персистирует в организме, преимущественно в B-лимфоцитах, и периодически реактивируется в эпителии верхних дыхательных путей. Наряду с инфекционным мононуклеозом вирус Эпштейна-Барр ассоциирован с рядом опухолевых заболеваний: назофарингеальной карциномой, лимфомой Беркитта, частью B-клеточных и T/NK-клеточных лимфом, посттрансплантационными лимфопролиферативными заболеваниями.

Клиническое значение

Главная клиническая ниша исследования отделяемого носоглотки на вирус Эпштейна-Барр — диагностика назофарингеальной карциномы. Эта опухоль имеет выраженное географическое распределение: наиболее высокая заболеваемость отмечается в странах Юго-Восточной Азии, южном Китае, на Ближнем Востоке и в ряде регионов северной Африки. В эндемичных регионах у 95% пациентов с назофарингеальной карциномой опухоль ассоциирована с вирусом Эпштейна-Барр. Вне эндемичных регионов заболевание встречается значительно реже, но также в большинстве случаев связано с вирусом.

Раннее выявление назофарингеальной карциномы существенно влияет на прогноз: пятилетняя выживаемость при ранних стадиях значительно выше, чем при распространённых формах. Опухоль расположена в труднодоступной для визуального осмотра зоне, и её ранние симптомы (заложенность уха, шум в ухе, носовые кровотечения, увеличение шейных лимфоузлов, заложенность носа) неспецифичны и нередко приписываются другим заболеваниям. При стойких неспецифических жалобах со стороны носоглотки и уха, особенно в сочетании с увеличением шейных лимфоузлов неясной этиологии у взрослых пациентов из групп риска, обнаружение ДНК вируса Эпштейна-Барр в мазке из носоглотки поддерживает диагностический поиск и может стать основанием для эндоскопического обследования с биопсией. Окончательный диагноз устанавливается по результатам гистологического и иммуногистохимического исследования с подтверждением вируса в опухолевой ткани.

В исследованиях показано, что в носоглоточном мазке у пациентов с назофарингеальной карциномой ДНК вируса обнаруживается в 90–95% случаев, при этом у здоровых людей без опухоли в эндемичных регионах частота положительных результатов существенно ниже. Это обеспечивает более высокую специфичность, чем у серологических маркёров (IgA к VCA, IgA к EBNA), которые традиционно используются для массового скрининга в эндемичных регионах. Мазок из носоглотки применяется в скрининговых программах у лиц из групп повышенного риска — родственников первой степени родства пациентов с назофарингеальной карциномой, а также людей, проживающих или имеющих семейные корни в эндемичных регионах. В сочетании с серологией ПЦР носоглоточного мазка позволяет более точно отобрать пациентов, которым показано эндоскопическое обследование.

У пациентов, получивших лучевую или химиолучевую терапию по поводу назофарингеальной карциномы, исследование применяется для контроля заболевания в динамике. Появление ДНК вируса в мазке у пролеченного пациента или её сохранение после окончания терапии может указывать на локальный рецидив опухоли и служит показанием для эндоскопического обследования.

Вне онкологического контекста диагностическая ценность исследования ограничена. Для стандартной диагностики инфекционного мононуклеоза применяются клиническая картина, общий анализ крови и серология; ПЦР носоглотки в этом случае самостоятельной роли не имеет. У пациентов с ослабленным иммунитетом вирус Эпштейна-Барр в носоглотке выделяется чаще, чем у здоровых, и обнаружение вируса в мазке обычно не имеет самостоятельного клинического значения; для мониторинга риска посттрансплантационных лимфопролиферативных заболеваний используется количественная ПЦР крови.

Ограничения метода

Положительный результат подтверждает лишь присутствие вирусной ДНК в мазке и не устанавливает диагноза самостоятельно. Вирус Эпштейна-Барр может выявляться в носоглотке у определённой доли здоровых людей, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом. Окончательный диагноз назофарингеальной карциномы устанавливается на основании гистологического исследования биоптата с подтверждением вируса в опухолевой ткани. 
Отрицательный результат не полностью исключает назофарингеальную карциному. Часть случаев, особенно ранних стадий, может протекать с вирусной нагрузкой в мазке ниже порога обнаружения. При клиническом подозрении на опухоль отрицательный результат не отменяет необходимости дальнейшего обследования, включая назофарингоскопию с биопсией. 
Качество мазка напрямую влияет на результат. Забор материала должен проводиться врачом, владеющим техникой получения носоглоточного мазка; поверхностный или недостаточно представительный соскоб может приводить к ложноотрицательным результатам. 
Тест показывает наличие или отсутствие вирусной ДНК, но не измеряет её количество. Для оценки вирусной нагрузки, которая имеет доказанную прогностическую ценность при назофарингеальной карциноме, применяется количественная ПЦР. 
Заключение формулирует лечащий врач (оториноларинголог, онколог, инфекционист) с учётом клинической картины, данных эндоскопического и визуализационного обследования, серологического статуса и, при необходимости, результатов биопсии и гистологического исследования.