ПЦР-диагностика вируса Эпштейна-Барр (EBV) в слюне

Исследование направлено на обнаружение вируса Эпштейна-Барр в слюне. Тест выявляет наличие или отсутствие вирусной ДНК в материале и не оценивает её количество. Методом ПЦР вирусная ДНК определяется в слюне, собранной из ротовой полости. Слюна — один из основных биоматериалов, в которых закономерно присутствует вирус Эпштейна-Барр, но именно эта закономерность определяет главную особенность исследования. Ротовая полость и ротоглотка — основной резервуар вируса в организме: после первичного заражения вирус активно размножается в эпителии ротоглотки и слюнных желёз, затем переходит в латентное состояние в B-лимфоцитах, периодически реактивируется и снова выделяется в слюну. Этот процесс продолжается пожизненно и у подавляющего большинства людей протекает бессимптомно. У здоровых взрослых с антителами к вирусу ДНК в слюне обнаруживается с частотой от 10–20% в разовой пробе до практически постоянного присутствия при регулярном тестировании; у людей с ослабленным иммунитетом частота и количество вируса в слюне значительно выше.

Вирус Эпштейна-Барр (EBV, HHV-4) — гамма-герпесвирус, распространённый в человеческой популяции повсеместно: к 18–25 годам доля людей с антителами к вирусу в крови достигает 90–95%. Передача вируса происходит главным образом через слюну, что нашло отражение в бытовом названии инфекционного мононуклеоза — «болезнь поцелуев». Стандартная диагностика ВЭБ-инфекции построена на клинической картине, общем анализе крови и серологическом исследовании: определении антител к капсидному антигену VCA (IgM и IgG), раннему антигену EA и ядерному антигену EBNA. Серология отвечает на вопросы о факте инфицирования, давности и стадии инфекции. ПЦР слюны отвечает на другой вопрос — есть ли в данный момент в слюне вирусная ДНК, и этот вопрос редко бывает клинически значимым изолированно.

Клиническое значение

В практической медицине ПЦР слюны на вирус Эпштейна-Барр не является стандартным методом диагностики инфекционного мононуклеоза и других ВЭБ-ассоциированных заболеваний. Объясняется это той самой высокой фоновой частотой присутствия вируса в слюне у здоровых людей, которая делает изолированный положительный результат мало информативным. Обнаружение ДНК ВЭБ в слюне у пациента с симптомами не доказывает, что именно этот вирус является причиной текущего заболевания — присутствие вируса может быть обычной бессимптомной находкой, совпавшей по времени с каким-то другим процессом.

Тем не менее исследование может применяться в ряде специфических клинических ситуаций.

Атипичное или нетипичное течение инфекционного мононуклеозоподобного синдрома. При тяжёлой, затяжной или нетипичной клинической картине, особенно в случаях, когда результаты серологии трудно интерпретировать (ранняя стадия инфекции, иммунодефицит, отсутствие характерного антительного ответа), обнаружение ДНК ВЭБ в слюне может служить дополнительным аргументом в пользу активной инфекции. Однако интерпретация возможна только в совокупности с клиническими данными, общим анализом крови и серологией.

Обследование детей с неясной лихорадкой и лимфаденопатией. У детей младшего возраста первичная инфекция часто протекает атипично или под маской других инфекций, а серологический ответ может запаздывать или быть неотчётливым. В этих случаях ПЦР слюны может использоваться как вспомогательный инструмент — но с учётом высокой частоты бессимптомного выделения вируса у детей.

Мониторинг пациентов с ослабленным иммунитетом. У реципиентов трансплантатов и онкогематологических пациентов вирусная активность в ротоглотке возрастает, и присутствие вируса в слюне у таких пациентов — ожидаемое явление. Самостоятельного клинического значения факт обнаружения ВЭБ в слюне в этой группе обычно не имеет; основным инструментом мониторинга риска посттрансплантационных лимфопролиферативных заболеваний остаётся количественная ПЦР крови. ПЦР слюны может использоваться в научно-клинических протоколах при изучении активности вируса в ротоглотке.

Эпидемиологические и исследовательские задачи. Слюна — удобный для сбора неинвазивный материал, который применяется в эпидемиологических исследованиях, в изучении передачи вируса, в наблюдении за бессимптомным носительством. В клинической практике индивидуального пациента такие задачи, как правило, не ставятся.

Рутинное обследование здоровых людей с помощью ПЦР слюны на вирус Эпштейна-Барр не показано. У большинства взрослых с антителами к вирусу слюна периодически содержит ДНК ВЭБ, и выявление этой ДНК не требует лечения и не является основанием для каких-либо клинических действий.

Ограничения метода

Высокая фоновая частота обнаружения вируса в слюне у бессимптомных людей — главное ограничение теста. Изолированный положительный результат не позволяет разграничить активную клинически значимую инфекцию и обычное бессимптомное вирусовыделение. 
Результат не различает первичную инфекцию и реактивацию латентной инфекции. Серологическое исследование более информативно для определения стадии процесса. 
Отрицательный результат не исключает инфицирования вирусом Эпштейна-Барр в целом: вирусовыделение в слюну носит периодический характер, и в момент взятия пробы вирус может не определяться. Также вирус может сохраняться в латентном состоянии в B-лимфоцитах без выделения в слюну. 
Тест показывает наличие или отсутствие вирусной ДНК, но не измеряет её количество и не оценивает активность репликации. Для количественной оценки при подозрении на ВЭБ-ассоциированные заболевания применяется количественная ПЦР в крови; для серологической диагностики используется определение специфических антител. 
Заключение формулирует лечащий врач (инфекционист, педиатр, оториноларинголог, гематолог) с учётом клинической картины, данных общего анализа крови, серологического статуса и других исследований в соответствии с клиническим вопросом