ПЦР-диагностика трихомонас вагиналис (Trichomonas vaginalis) в секрете простаты/эякуляте

Анализ выявляет ДНК Trichomonas vaginalis в секрете предстательной железы или эякуляте методом ПЦР. Результат выдаётся в формате обнаружено / не обнаружено. Исследование обсуждается в отдельных клинических ситуациях у мужчин, связанных с подозрением на трихомониаз. Секрет простаты и эякулят не входят в рекомендованные биоматериалы для диагностики трихомонадной инфекции у мужчин: в международных алгоритмах референсным материалом для молекулярного выявления T. vaginalis у мужчин служит первая порция мочи, а также уретральный мазок. Клиническая чувствительность ПЦР секрета простаты и эякулята ниже, и исследование этих биоматериалов применяется как дополнительное или в клинических ситуациях, где доступ к стандартному материалу ограничен.

Trichomonas vaginalis — жгутиковое простейшее из отряда Trichomonadida, единственный представитель трихомонад, патогенный для человека в урогенитальной системе. Возбудитель существует в одной активной форме — трофозоита грушевидной формы, подвижного за счёт нескольких жгутиков, с характерной ундулирующей мембраной. Стадии цисты у T. vaginalis нет, что объясняет низкую устойчивость паразита во внешней среде и исключительно контактный путь передачи — преимущественно половой. Паразит располагается внеклеточно на поверхности эпителия урогенитального тракта, получая питательные вещества из окружающей жидкой среды. 
Передача инфекции происходит при половых контактах. Возбудитель поражает у женщин влагалище, уретру, эндоцервикс, реже — вышележащие отделы репродуктивного тракта; у мужчин — уретру, предстательную железу, семенные пузырьки. T. vaginalis — один из самых распространённых возбудителей инфекций, передающихся половым путём, в мировом масштабе. 
Клиническая картина у мужчин существенно отличается от таковой у женщин. У женщин трихомониаз чаще проявляется клинически — выделениями из половых путей, зудом, дискомфортом, признаками вагинита и цервицита. У мужчин инфекция в большинстве случаев протекает бессимптомно или малосимптомно; клинически значимая форма — негонококковый уретрит с характерными признаками уретральной симптоматики. Обсуждается роль T. vaginalis в развитии простатита и эпидидимита, однако устойчивых причинных связей с этими состояниями не установлено. У мужчин инфекция нередко разрешается самопроизвольно за счёт элиминации паразита из мужского урогенитального тракта, что отличает её течение от хронической персистенции у женщин. 
T. vaginalis относится к облигатным патогенам. В отличие от условно-патогенных микроорганизмов урогенитального тракта — уреаплазм, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, — возбудитель не входит в состав нормальной микрофлоры ни у мужчин, ни у женщин; его обнаружение клинически значимо и служит основанием для лечения независимо от наличия симптомов. Эта особенность определяет подход к ведению инфекции: эрадикационная терапия показана всем пациентам с подтверждённым трихомониазом — для предотвращения передачи возбудителя и возможных отсроченных последствий, включая ассоциированное повышение риска инфицирования ВИЧ и осложнений в репродуктивной сфере.

Микроскопическое исследование нативного мазка остаётся доступным и быстрым методом у женщин, но у мужчин малочувствительно из-за низкой концентрации возбудителя в мужском урогенитальном тракте. Культуральное исследование требует специальных сред и также уступает по чувствительности молекулярным методам. ПЦР — предпочтительный метод диагностики трихомониаза в современных рекомендациях, обеспечивающий наиболее высокую клиническую чувствительность в клинически значимых биоматериалах.

ПЦР выявляет специфические участки генома T. vaginalis — многокопийные повторы или консервативные последовательности — и обеспечивает прямое выявление возбудителя. Метод не зависит от жизнеспособности паразита, сохраняет чувствительность при малом количестве возбудителя в пробе и не требует культивирования. В секрете простаты и эякуляте концентрация паразита, как правило, ниже, чем в моче и уретральном материале, что снижает клиническую чувствительность исследования по сравнению с референсными биоматериалами.

Клиническое значение

Основная клиническая ситуация, в которой обсуждается данное исследование, — обследование мужчин с подозрением на трихомониаз или с установленным контактом с инфицированным половым партнёром, когда выбор эякулята или секрета простаты в качестве биоматериала обусловлен клиническими обстоятельствами или комплексной оценкой состояния мужской репродуктивной системы. Стандартным биоматериалом для диагностики трихомониаза у мужчин остаётся первая порция мочи, и именно она рассматривается как биоматериал выбора при первичной лабораторной верификации инфекции. Исследование секрета простаты и эякулята не заменяет стандартную диагностику, но может дополнить её в отдельных клинических ситуациях — при комплексном обследовании по поводу симптомов со стороны предстательной железы, при обследовании в рамках диагностического поиска у пар с нарушениями фертильности.

Обоснованные показания к обследованию мужчин на T. vaginalis включают симптоматический негонококковый уретрит при отрицательных результатах на другие возбудители, обследование половых партнёров женщин с подтверждённым трихомониазом, обследование в рамках комплексной оценки по поводу ИППП при наличии соответствующего полового анамнеза, обследование мужчин с ВИЧ-инфекцией в отдельных программах ведения таких пациентов. Рутинное скрининговое тестирование всех сексуально активных мужчин на трихомониаз в международных рекомендациях не рекомендовано.

Положительный результат подтверждает наличие T. vaginalis в исследованном материале и является основанием для назначения этиотропной терапии — препаратами группы нитроимидазолов (метронидазол, тинидазол), активными в отношении возбудителя. Одновременно проводится обследование и лечение половых партнёров — стандартный подход при ведении трихомониаза, поскольку возбудитель относится к облигатным патогенам и его выявление у партнёра служит основанием для терапии независимо от наличия симптомов. Параллельно показано тестирование на сопутствующие инфекции, передающиеся половым путём, — C. trachomatis, N. gonorrhoeae, M. genitalium, серологическое обследование на сифилис и ВИЧ.

Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии выявляемого количества возбудителя в исследованной пробе. При сохраняющемся клиническом или эпидемиологическом подозрении на трихомониаз исследование дополняется или заменяется исследованием референсного биоматериала — первой порции мочи, уретрального мазка, — поскольку клиническая чувствительность ПЦР секрета простаты и эякулята ниже, чем у стандартных биоматериалов.

Ограничения

Метод ПЦР выявляет ДНК возбудителя и не говорит о его жизнеспособности: при контрольном исследовании в короткие сроки после завершения терапии возможен ложноположительный результат за счёт остаточной ДНК уже элиминированного паразита, поэтому оценка эффективности лечения молекулярным методом выполняется не ранее чем через три-четыре недели после завершения курса терапии. Секрет простаты и эякулят не относятся к стандартным биоматериалам для диагностики трихомониаза у мужчин: в международных алгоритмах референсным материалом служит первая порция мочи, а также уретральный мазок. Клиническая чувствительность ПЦР секрета простаты и эякулята ниже, и отрицательный результат не исключает трихомониаз; при сохраняющемся клиническом подозрении необходимо исследование референсного биоматериала. Эякулят содержит компоненты, потенциально ингибирующие ПЦР-реакцию, что при неоптимальных условиях забора и транспортировки может дополнительно снижать аналитическую чувствительность исследования. На чувствительность метода влияет также предшествующая противопаразитарная терапия, снижающая количество возбудителя в материале. ПЦР не определяет чувствительность T. vaginalis к антипротозойным препаратам; для возбудителя описана клинически значимая устойчивость к нитроимидазолам, и в сложных клинических ситуациях при неэффективности стандартной терапии для оценки чувствительности выполняется культуральное исследование с определением чувствительности, доступное в специализированных лабораториях. Результат исследования требует интерпретации врачом — урологом, андрологом, дерматовенерологом — с учётом клинической картины, данных полового анамнеза, результатов обследования на сопутствующие инфекции, передающиеся половым путём, и общей клинической ситуации.