ПЦР-диагностика парвовируса B19 в носоглотке

Парвовирус B19 поражает клетки-предшественники эритроцитов и передаётся преимущественно через респираторные выделения. В начале инфекции вирус размножается и попадает в кровь, а его ДНК может временно определяться в отделяемом верхних дыхательных путей. В этот период возможны лихорадка, насморк, боль в горле, головная и мышечная боль. Позже у детей может появиться яркая эритема щёк с распространением сыпи на туловище и конечности, у взрослых чаще возникают боли и припухлость суставов. Многие случаи протекают бессимптомно или сопровождаются неспецифическими признаками респираторной инфекции. Исследование выявляет ДНК парвовируса B19 методом ПЦР в мазке из носоглотки. Анализ наиболее информативен в раннюю фазу инфекции, когда вирус присутствует в респираторных выделениях. После появления сыпи или суставных симптомов количество вирусной ДНК в носоглотке может быстро снижаться, поэтому отрицательный результат, полученный на более позднем этапе заболевания, не исключает перенесённую или продолжающуюся инфекцию. В таких ситуациях результат сопоставляют с клинической картиной и при необходимости дополняют определением антител IgM и IgG или ДНК вируса в крови.

Клиническое значение

Положительный результат означает, что в исследованном материале обнаружена ДНК парвовируса B19. При наличии симптомов и соответствующих сроков заболевания результат подтверждает текущую инфекцию и может использоваться при дифференциальной диагностике лихорадки с сыпью, особенно при необходимости отличить парвовирусную инфекцию от кори, краснухи и других экзантем. Отрицательный результат означает, что ДНК парвовируса B19 в образце не обнаружена либо её количество находится ниже чувствительности метода. Такой результат снижает вероятность выделения вируса через носоглотку на момент взятия материала. Он не исключает инфекцию при позднем обращении, после появления сыпи, при недостаточном количестве материала или при преимущественном присутствии вируса в крови. Результат ПЦР оценивают вместе со сроками заболевания, симптомами и данными других лабораторных исследований.

У большинства иммунокомпетентных детей и взрослых инфекция протекает легко и завершается самостоятельно. Клиническое значение подтверждения парвовируса B19 возрастает у пациентов с хроническими гемолитическими заболеваниями. Временное подавление эритропоэза у таких пациентов может вызвать транзиторный апластический криз с резким снижением гемоглобина и количества ретикулоцитов. К группе риска относятся пациенты с серповидноклеточной болезнью, талассемией, наследственным сфероцитозом и другими состояниями, сопровождающимися ускоренным разрушением эритроцитов. У пациентов с иммунодефицитом вирус может сохраняться длительно и вызывать хроническую анемию вследствие подавления образования эритроцитов. В этой группе определение вирусной ДНК имеет особое значение, поскольку продукция антител может быть снижена и серологическое исследование иногда даёт отрицательный результат. Для оценки системной или персистирующей инфекции предпочтительно исследование крови, поскольку отсутствие ДНК в носоглотке не исключает вирусемию.

Инфицирование во время беременности может сопровождаться передачей вируса плоду. В редких случаях это приводит к тяжёлой анемии плода, водянке и потере беременности. ПЦР мазка из носоглотки может подтвердить присутствие вируса в ранний период респираторного выделения, однако результат сам по себе не устанавливает внутриутробное инфицирование. При симптомах или контакте с больным беременной требуется исследование крови на антитела к парвовирусу B19, а дальнейшее наблюдение определяет акушер-гинеколог.

Что влияет на результат анализа

На выявление ДНК парвовируса B19 прежде всего влияет срок взятия материала. Вирус присутствует в респираторных выделениях преимущественно во время ранней, продромальной фазы. К моменту появления характерной сыпи или артралгии выделение вируса часто прекращается, что повышает вероятность отрицательного результата при сохраняющейся клинической связи с недавно перенесённой инфекцией. Поверхностное взятие мазка, недостаточное количество носоглоточного секрета и клеточного материала могут снизить чувствительность исследования. На достоверность также влияют нарушение условий транспортировки и хранения, высыхание тампона, повреждение ДНК и присутствие веществ, подавляющих ПЦР. Загрязнение образца вирусной ДНК может привести к ложноположительному результату. Правильная маркировка материала и соблюдение правил взятия, упаковки и доставки необходимы для его достоверной идентификации.