ПЦР-диагностика микобактерий туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis) в выпотных жидкостях
Информация об исследовании
Данное качественное исследование направлено на обнаружение генетического материала (ДНК) возбудителя туберкулёза — Mycobacterium tuberculosis — в выпотных жидкостях организма. К таким жидкостям относятся плевральный, перикардиальный, перитонеальный выпот, а также жидкость из суставных полостей. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет многократно копировать специфические фрагменты ДНК микобактерий, что делает возможным их выявление даже при крайне малом количестве возбудителя в образце. Результат исследования является качественным: он показывает, присутствует ли ДНК Mycobacterium tuberculosis в биоматериале или нет.
Туберкулёз способен поражать не только лёгкие, но и серозные оболочки, выстилающие полости тела. В таких случаях возникает патологический выпот, природа которого зачастую остаётся неясной без специальной лабораторной диагностики. Классические методы выявления микобактерий туберкулёза, такие как бактериоскопия мазков с окраской по Цилю — Нильсену и посев на питательные среды, имеют существенные ограничения при работе с выпотными жидкостями. Бактериоскопия обладает низкой чувствительностью в подобных образцах, поскольку концентрация возбудителя в серозных выпотах, как правило, невелика. Культуральное исследование, считающееся «золотым стандартом», требует от нескольких недель до двух месяцев для получения результата. ПЦР-диагностика туберкулёза в выпотных жидкостях решает обе эти проблемы: метод обеспечивает высокую аналитическую чувствительность и позволяет получить ответ в сжатые сроки.
Клиническое значение
Определение ДНК микобактерий туберкулёза в выпотных жидкостях методом ПЦР имеет первостепенное значение для дифференциальной диагностики экссудативных процессов. Когда у пациента обнаруживается плевральный выпот неясной этиологии, перед клиницистом стоит задача разграничить туберкулёзный плеврит, онкологический процесс, неспецифическое воспаление и другие причины. Аналогичная диагностическая дилемма возникает при перикардите или асците. Положительный результат ПЦР-исследования на Mycobacterium tuberculosis является весомым аргументом в пользу туберкулёзной этиологии заболевания и позволяет незамедлительно начать специфическую противотуберкулёзную терапию.
Исследование особенно востребовано у пациентов с иммунодефицитными состояниями, в том числе у лиц, живущих с ВИЧ-инфекцией. У таких пациентов внелёгочные формы туберкулёза встречаются значительно чаще, а клиническая картина нередко бывает стёртой и атипичной. Молекулярно-генетическая диагностика туберкулёза в этой группе приобретает особую ценность, поскольку позволяет быстро верифицировать диагноз даже при отсутствии характерных симптомов. Кроме того, результаты ПЦР-исследования помогают врачу принять обоснованное решение о необходимости инвазивных диагностических процедур, таких как биопсия серозных оболочек.
Ограничения метода
Несмотря на высокую аналитическую чувствительность, ПЦР-диагностика туберкулёза в выпотных жидкостях имеет ряд ограничений, которые необходимо учитывать при интерпретации результатов. Отрицательный результат не исключает полностью туберкулёзную природу выпота. Это объясняется тем, что при серозитах воспалительный процесс зачастую обусловлен иммунологическими реакциями, а количество самих микобактерий в жидкости может быть ниже порога обнаружения метода. Проще говоря, болезнь может присутствовать, но возбудителя в конкретном образце оказывается слишком мало.
Положительный результат ПЦР не позволяет отличить живые микобактерии от погибших, поэтому он не может использоваться как единственный критерий активности инфекционного процесса. Врач назначает данное исследование при наличии экссудативного выпота неясного генеза, особенно если имеются эпидемиологические факторы риска, контакт с больным туберкулёзом в анамнезе, характерные изменения при визуализирующих исследованиях или лабораторные признаки, указывающие на специфическое воспаление. Результат всегда оценивается в совокупности с данными клинической картины, лучевой диагностики, биохимического и цитологического анализа выпотной жидкости, а также результатами иммунологических тестов на туберкулёз.
Когда назначают анализ
- Дифференциальная диагностика экссудативного плеврита, перикардита или асцита неясной этиологии для подтверждения или исключения туберкулезного генеза выпота при низкой чувствительности микроскопии и длительности культурального исследования.
- Обследование пациентов с подозрением на туберкулезный плеврит, перитонит или перикардит при наличии клинико-рентгенологических данных, положительных иммунологических тестов или контакта с больным туберкулезом.
- Исследование выпотных жидкостей у пациентов с ВИЧ-инфекцией и другими иммунодефицитными состояниями, у которых внелегочные и серозные формы туберкулеза встречаются чаще, а клиническая картина атипична.
- Уточнение этиологии полисерозита или рецидивирующего экссудативного процесса, когда результаты цитологического, биохимического исследования и посева не позволяют установить причину.
- Обследование при подозрении на туберкулез у пациентов, уже получающих противотуберкулезную терапию, когда культуральное исследование может давать ложноотрицательный результат из-за снижения жизнеспособности микобактерий.
- Дополнительное исследование при диагностике туберкулеза серозных оболочек в сочетании с другими методами (аденозиндезаминаза, гистологическое исследование биоптата, посев), поскольку чувствительность ПЦР в выпотных жидкостях ограничена из-за низкой бактериальной нагрузки.
- Может рассматриваться при длительной лихорадке неясного генеза с формированием выпота в серозных полостях — для исключения туберкулезной этиологии при отсутствии других установленных причин.
Как подготовиться к анализу
Общие требования:
- Выпотные жидкости (плевральная, перикардиальная, асцитическая, синовиальная) получают в условиях стационара или дневного стационара путём пункции соответствующей полости. Процедуру выполняет врач соответствующей специальности.
- Специальной подготовки со стороны пациента для молекулярно-генетического исследования выпотной жидкости не требуется. Приём пищи, воды и лекарственных препаратов на результат ПЦР не влияет.
- Перед пункцией проводится клиническое обследование, визуализация (УЗИ, рентгенография, КТ) и оценка показаний к процедуре лечащим врачом.
Лекарственные препараты:
- О приёме противотуберкулёзных препаратов, антибиотиков широкого спектра действия, а также о ранее проведённых курсах противотуберкулёзной терапии следует сообщить лечащему врачу: эта информация учитывается при клинической интерпретации результата.
- О постоянно принимаемых антикоагулянтах и антиагрегантах (варфарин, прямые оральные антикоагулянты, ацетилсалициловая кислота, клопидогрел) необходимо предупредить врача заблаговременно. Вопрос временной отмены решается индивидуально, поскольку пункция сопровождается риском кровотечения.
- Плановую терапию без согласования с лечащим врачом отменять не следует.
Особенности забора биоматериала:
- Биоматериал получают путём пункции соответствующей полости в стерильных условиях с соблюдением правил асептики.
- Для исследования требуется объём не менее 3–5 мл выпотной жидкости; больший объём повышает чувствительность метода при низкой бактериальной нагрузке.
- Образец помещают в стерильный контейнер без консервантов и антикоагулянтов, если иное не указано в инструкции лаборатории.
- Контейнер подписывается с указанием фамилии и инициалов пациента, даты и времени забора, типа биоматериала и локализации пункции.
Транспортировка:
- Доставка биоматериала в лабораторное отделение осуществляется в максимально короткие сроки, оптимально в течение 2 часов после забора.
- При невозможности немедленной доставки образец хранится при температуре 2–8 °C. Замораживание образца допускается только по согласованию с лабораторией.
- Транспортировка проводится в герметичном контейнере с соблюдением температурного режима и требований биологической безопасности.
Стоимость исследования
биоматериала 0 ₽