Определение антигенов токсинов клостридий A и B (Clostridium difficile) в кале

Токсины A и B являются основными факторами патогенности Clostridioides difficile (прежнее название Clostridium difficile ), спорообразующей анаэробной бактерии, заселяющей толстую кишку. Оба белка относятся к крупным клостридиальным глюкозилтрансферазам: попав в цитоплазму колоноцита, они переносят остаток глюкозы на малые ГТФазы семейства Rho и Rac и тем самым выключают их. Актиновый цитоскелет разрушается, плотные контакты между клетками эпителия теряют герметичность, клетки округляются и погибают, в слизистую мигрируют нейтрофилы, а на поверхности формируются фибринозные наложения, дающие картину псевдомембранозного колита. Токсин B обладает более высокой цитотоксической активностью, токсин A дополняет его действие, повреждая эпителиальный барьер и усиливая секрецию жидкости. Токсины появляются в содержимом кишечника только тогда, когда токсигенный штамм активно размножается: обычно это происходит после антибактериальной терапии, подавившей нормальную микробиоту и освободившей экологическую нишу для проросших спор. Штаммы, лишённые генов токсинов, заболевания не вызывают и токсины в кале не образуют. Исследование выявляет в образце кала сами белковые антигены токсинов A и B, результат качественный и отражает текущую продукцию токсинов в кишечнике.

Клинически исследование применяется при диарее, развившейся на фоне или после приёма антибиотиков, а также при внутрибольничной диарее у пожилых, у пациентов после хирургических вмешательств, при химиотерапии, иммуносупрессии, длительной госпитализации и приёме ингибиторов протонной помпы. Показанием служит неоформленный стул, как правило три и более эпизодов за сутки, часто в сочетании с болью в животе, лихорадкой и лейкоцитозом. Обнаружение токсинов в кале у пациента с такой клинической картиной говорит о том, что диарея связана с действием токсигенной C. difficile , и служит основанием для назначения направленной против этого возбудителя терапии и противоэпидемических мер в стационаре. Определение антигенов токсинов обладает высокой специфичностью при умеренной чувствительности, поэтому отрицательный результат при сохраняющихся симптомах оценивают вместе с клиническими данными и результатами дальнейшего обследования. В двухступенчатых диагностических алгоритмах именно выявление токсинов уточняет значение находки самого возбудителя или его генов: положительный токсиновый результат указывает на клостридиальную инфекцию, тогда как обнаружение токсигенного штамма при отсутствии токсинов в кале чаще соответствует носительству.

Интерпретация зависит от клинического контекста, поскольку бессимптомное носительство C. difficile распространено среди госпитализированных пациентов, обитателей домов длительного ухода и особенно среди детей первых двух лет жизни, у которых токсигенные штаммы и их токсины нередко присутствуют в кишечнике без заболевания. При оформленном стуле и отсутствии симптомов исследование не несёт диагностической информации, а положительный результат в такой ситуации не служит поводом для лечения. Диарея у получающего антибиотики пациента может иметь и другие причины: прямое влияние препаратов на моторику и состав микробиоты, другие кишечные инфекции, обострение воспалительного заболевания кишечника, энтеральное питание. Степень выраженности реакции и сам факт обнаружения токсинов не отражают тяжесть колита, которая оценивается по клиническим и лабораторно-инструментальным признакам, включая уровень лейкоцитов, креатинина, альбумина и данные визуализации. Повторное исследование для подтверждения излечения не используется, так как токсины могут продолжать выявляться при разрешившихся симптомах, а критерием ответа служит нормализация стула; повторное тестирование обосновано при возобновлении диареи после завершения терапии, когда обсуждается рецидив инфекции.