Онкогенетическое исследование рака легкого: мутации EGFR экзоны 18, 19, 20, 21, KRAS кодоны 12, 13, BRAF V600E, HER2

Исследование выявляет соматические мутации в генах EGFR, KRAS, BRAF и HER2 (ERBB2) в опухолевой ткани рака лёгкого. Эти гены кодируют белки, участвующие в передаче сигналов, регулирующих рост, деление и выживание клеток. Активирующие мутации способны поддерживать постоянную работу соответствующих сигнальных путей и становиться одним из механизмов опухолевого роста. При немелкоклеточном раке лёгкого такие молекулярные изменения формируют отдельные варианты опухоли с различными биологическими свойствами и чувствительностью к таргетным препаратам.

EGFR кодирует рецептор эпидермального фактора роста, расположенный на поверхности клетки и обладающий тирозинкиназной активностью. После связывания с фактором роста рецептор запускает внутриклеточные сигнальные пути, регулирующие пролиферацию и выживание клеток. При раке лёгкого клинически значимые мутации преимущественно располагаются в экзонах 18–21, кодирующих тирозинкиназный домен EGFR. Активирующие изменения нарушают нормальную регуляцию рецептора и поддерживают передачу ростового сигнала независимо от физиологической стимуляции.
KRAS кодирует внутриклеточный белок семейства RAS, передающий сигнал от мембранных рецепторов к компонентам сигнального пути RAF-MEK-ERK. Активирующие мутации KRAS фиксируют белок в функционально активном состоянии и поддерживают пролиферативный сигнал независимо от нормальной регуляции рецепторов. В данном исследовании анализируются кодоны 12 и 13, в которых располагается значительная часть онкогенных вариантов KRAS при аденокарциноме лёгкого.
BRAF кодирует серин-треониновую киназу, расположенную ниже RAS в сигнальном пути RAF-MEK-ERK. Мутация BRAF V600E изменяет активность белка BRAF и приводит к постоянной передаче пролиферативного сигнала, поддерживающего рост и выживание опухолевых клеток. Этот вариант представляет собой отдельный драйверный механизм развития части немелкоклеточных опухолей лёгкого.
HER2 (ERBB2) кодирует мембранный рецептор семейства ERBB с тирозинкиназной активностью. В нормальных клетках рецепторы этого семейства участвуют в регуляции роста и дифференцировки, а активирующие мутации ERBB2 способны поддерживать постоянную передачу пролиферативного сигнала. При немелкоклеточном раке лёгкого особое значение имеют мутации тирозинкиназного домена HER2, включая варианты, расположенные в 20-м экзоне.

Исследование выполняется методом ПЦР в биопсийном или операционном материале, заключённом в парафиновый блок. Для HER2 лаборатория заявляет определение мутаций гена ERBB2, однако конкретный перечень исследуемых вариантов или экзонов в публичном описании не указан. Результат HER2 относится к мутациям, входящим в аналитический диапазон используемой ПЦР-панели.

Клиническое значение

Мутационный статус EGFR используется для определения возможности EGFR-направленной терапии при немелкоклеточном раке лёгкого. Делеции 19-го экзона и мутация L858R в 21-м экзоне относятся к наиболее распространённым сенситизирующим вариантам и характеризуют опухоли, чувствительные к ингибиторам тирозинкиназы EGFR. Изменения 20-го экзона представляют отдельную молекулярную группу: в частности, инсерции этого экзона имеют собственные варианты таргетного лечения и отличаются по терапевтическому значению от классических сенситизирующих мутаций.
Выявление мутаций KRAS характеризует опухоль с активированным RAS-сигнальным путём. Среди исследуемых вариантов особое терапевтическое значение имеет KRAS G12C, для которой разработаны специфические ингибиторы мутантного белка. Другие мутации кодонов 12 и 13 также определяют KRAS-зависимый молекулярный вариант опухоли, однако не обладают той же лекарственной мишенью, что G12C. Поэтому клиническая интерпретация результата зависит от конкретного выявленного варианта KRAS.
Мутация BRAF V600E выделяет самостоятельный молекулярный вариант немелкоклеточного рака лёгкого и определяет возможность применения терапии, направленной на сигнальный путь BRAF-MEK. Клиническое значение связано именно с вариантом V600E, который исследуется в составе данной панели.
Мутации HER2 (ERBB2) формируют отдельную терапевтически значимую группу немелкоклеточного рака лёгкого. Активирующие изменения тирозинкиназного домена HER2, включая ряд мутаций 20-го экзона, связаны с чувствительностью к HER2-направленным препаратам. Значение положительного результата определяется конкретным вариантом ERBB2 и наличием для него установленной терапевтической мишени.
Исследование особенно значимо при аденокарциноме и других неплоскоклеточных вариантах немелкоклеточного рака лёгкого, где выявление драйверных мутаций непосредственно связано с выбором системной терапии. Определение EGFR, KRAS, BRAF V600E и HER2 позволяет установить один из нескольких возможных молекулярных механизмов опухолевого роста и использовать эти данные при выборе таргетного лечения.

Что влияет на результат

Генетический состав рака лёгкого может различаться между отдельными участками первичной опухоли и метастатическими очагами. В процессе прогрессирования заболевания изменяется соотношение опухолевых клонов, поэтому образцы, полученные из разных очагов или в разные периоды заболевания, могут содержать различающийся набор мутаций. Системная и особенно таргетная терапия создаёт селективное давление на опухоль и способствует изменению её клонального состава. При прогрессировании после таргетного лечения могут формироваться дополнительные молекулярные механизмы резистентности, поэтому генетический профиль повторно исследованного опухолевого материала способен отличаться от исходного.