Для врача 
Молекулярно-генетическое исследование при колоректальном раке (MSI, BRAF, KRAS, NRAS)
Информация об исследовании
Что такое молекулярно-генетическое исследование при колоректальном раке (MSI, BRAF, KRAS, NRAS)
Молекулярно-генетическое исследование при колоректальном раке представляет собой комплексный анализ опухолевой ткани, направленный на выявление ключевых генетических нарушений, определяющих биологическое поведение опухоли и её чувствительность к терапии. В рамках одного исследования оценивается сразу несколько молекулярных маркеров: микросателлитная нестабильность (MSI), а также мутации в генах BRAF, KRAS и NRAS. Каждый из этих параметров несёт уникальную диагностическую информацию, а их совокупный анализ формирует целостную молекулярную характеристику опухоли.
Микросателлитная нестабильность отражает нарушение работы системы репарации ошибок спаривания ДНК (mismatch repair, MMR). Микросателлиты — это короткие повторяющиеся последовательности ДНК, которые особенно уязвимы к ошибкам при копировании генома. Когда система исправления этих ошибок работает некорректно, в микросателлитных участках накапливаются мутации, что и определяется как MSI. Проще говоря, это маркер того, что клетки опухоли утратили способность «чинить» собственную ДНК. Высокий уровень микросателлитной нестабильности (MSI-H) обнаруживается примерно в 15% случаев колоректального рака и может указывать на синдром Линча — наследственную предрасположенность к развитию злокачественных новообразований.
Гены KRAS, NRAS и BRAF кодируют белки сигнального каскада RAS-RAF-MEK-ERK, который регулирует клеточное деление, рост и выживание. Мутации в этих генах приводят к постоянной активации сигнального пути вне зависимости от внешних стимулов, что способствует неконтролируемой пролиферации опухолевых клеток. Мутации KRAS встречаются приблизительно в 40% случаев колоректального рака, мутации NRAS — примерно в 3–5%, а мутация BRAF V600E — в 8–10% случаев. Эти цифры подчёркивают, насколько распространены данные нарушения и насколько важно их своевременное выявление.
Клиническое значение
Результаты молекулярно-генетического исследования при колоректальном раке играют решающую роль в выборе стратегии лечения. Определение мутационного статуса генов KRAS и NRAS является обязательным условием перед назначением таргетной терапии ингибиторами рецептора эпидермального фактора роста (анти-EGFR препаратами). При наличии активирующих мутаций в любом из этих генов применение анти-EGFR терапии неэффективно, поскольку сигнальный каскад остаётся активным ниже точки воздействия препарата. Без этого анализа назначение таргетной терапии невозможно.
Мутация BRAF V600E ассоциирована с агрессивным течением заболевания, худшим прогнозом и специфическим паттерном метастазирования, включая перитонеальную диссеминацию. Одновременно наличие этой мутации открывает возможность для применения комбинированной таргетной терапии ингибиторами BRAF в сочетании с ингибиторами EGFR. Статус MSI имеет двойное значение: с одной стороны, опухоли с высокой микросателлитной нестабильностью характеризуются более благоприятным прогнозом на ранних стадиях, с другой — они демонстрируют выраженный ответ на иммунотерапию ингибиторами контрольных точек иммунитета при метастатическом процессе. Кроме того, выявление MSI-H служит основанием для генетического консультирования пациента и его родственников с целью исключения синдрома Линча.
Ограничения метода
Молекулярно-генетическое исследование при колоректальном раке проводится на образцах опухолевой ткани, что предполагает наличие достаточного количества качественного биоматериала. При низком содержании опухолевых клеток в образце или при выраженных некротических изменениях ткани результаты могут быть неинформативными. Также следует учитывать явление внутриопухолевой гетерогенности: различные участки одной опухоли могут содержать клоны с разным мутационным профилем, и результат анализа отражает молекулярный портрет только исследованного фрагмента. Отрицательный результат по всем маркерам не исключает наличия иных генетических нарушений, не входящих в панель данного исследования. Интерпретация результатов должна проводиться лечащим врачом-онкологом в контексте стадии заболевания, морфологической характеристики опухоли и общего состояния пациента.
Когда назначают анализ
- Верификация микросателлитной нестабильности (MSI) при гистологически подтверждённом колоректальном раке для определения прогноза и тактики лечения
- Подбор таргетной терапии — молекулярно-генетическое исследование мутаций KRAS, NRAS и BRAF необходимо для оценки чувствительности опухоли к анти-EGFR препаратам (цетуксимаб, панитумумаб)
- Определение мутационного статуса гена BRAF V600E при колоректальном раке как независимого маркёра неблагоприятного прогноза и резистентности к стандартным схемам химиотерапии
- Скрининг на синдром Линча (наследственный неполипозный колоректальный рак) при выявлении высокого уровня микросателлитной нестабильности (MSI-H) у пациентов моложе 50 лет
- Планирование иммунотерапии — опухоли с высокой микросателлитной нестабильностью являются кандидатами для назначения ингибиторов контрольных точек иммунного ответа (пембролизумаб, ниволумаб)
- Оценка мутаций KRAS (кодоны 12, 13, 59, 61, 117, 146) при метастатическом колоректальном раке перед принятием решения о назначении первой линии терапии
- Исследование мутаций NRAS для исключения активирующих мутаций, при которых применение анти-EGFR моноклональных антител противопоказано ввиду отсутствия эффективности
- Прогрессирование или рецидив колоректального рака — повторное молекулярно-генетическое исследование для выявления возможных изменений мутационного профиля опухоли и коррекции терапевтической стратегии
- Дифференциальная диагностика спорадического и наследственного колоректального рака — сочетание мутации BRAF V600E с MSI-H характерно для спорадических форм заболевания
- Отягощённый семейный анамнез по колоректальному раку или раку эндометрия у родственников первой линии родства, особенно при наличии множественных случаев заболевания в семье
- Предоперационная молекулярная диагностика при локализованном колоректальном раке для стратификации риска (разделения пациентов на группы по степени агрессивности опухоли) и выбора объёма хирургического вмешательства
- Определение целесообразности адъювантной химиотерапии при II стадии колоректального рака, поскольку MSI-H статус ассоциирован с благоприятным прогнозом и сниженной эффективностью монотерапии фторпиримидинами
- Мониторинг эффективности проводимой таргетной или иммунотерапии у пациентов с ранее установленным мутационным статусом генов KRAS, NRAS, BRAF
- Выявление первично-множественных опухолей толстой кишки — молекулярно-генетическое исследование MSI позволяет заподозрить наследственный характер заболевания и рекомендовать расширенное генетическое консультирование
Как подготовиться к анализу
Общие требования:
- Молекулярно-генетическое исследование выполняется на образцах опухолевой ткани (биопсийный или операционный материал), поэтому классическая подготовка «натощак» в данном случае не требуется. Материал для анализа получают в ходе биопсии, эндоскопического удаления полипа или хирургической операции.
- Если исследование проводится на уже имеющемся парафиновом блоке (архивном материале), дополнительная подготовка пациента не нужна. Достаточно предоставить в лабораторию гистологические блоки или нарезанные стёкла с опухолевой тканью, а также копию гистологического заключения.
- В отдельных случаях анализ мутаций KRAS, NRAS, BRAF и микросателлитной нестабильности (MSI) может выполняться по образцу венозной крови (жидкостная биопсия). В такой ситуации кровь сдаётся натощак, после голодания не менее 8 часов. Допускается пить чистую воду без газа.
Диета:
- Если исследование проводится на тканевом материале, соблюдение какой-либо диеты не требуется.
- При сдаче крови для жидкостной биопсии рекомендуется за сутки исключить жирную и жареную пищу, а также алкогольные напитки. Это позволяет избежать липемии сыворотки, которая способна повлиять на качество выделения нуклеиновых кислот.
Лекарственные препараты:
- Обязательно сообщите лечащему врачу обо всех принимаемых лекарственных средствах, особенно о противоопухолевой и иммуносупрессивной терапии. Проведение химиотерапии может влиять на количество циркулирующей опухолевой ДНК в крови.
- Отменять назначенное лечение самостоятельно нельзя. Решение о временной паузе в приёме препаратов принимает только лечащий врач с учётом клинической ситуации.
Другие ограничения:
- Если запланирована биопсия для получения материала, накануне процедуры следует избегать интенсивных физических нагрузок и постараться минимизировать эмоциональное напряжение. Спокойное состояние организма способствует более комфортному проведению манипуляции.
- Курение рекомендуется исключить как минимум за час до забора крови или проведения биопсии.
- Перед процедурой важно проинформировать врача о наличии аллергических реакций на анестетики, а также о приёме антикоагулянтов и антиагрегантов, поскольку эти препараты повышают риск кровотечения при биопсии.
Стоимость исследования
биоматериала 0 ₽