Молекулярно-генетическое исследование мутаций в гене RUNX1-RUNX1T1 методом ПЦР

RUNX1-RUNX1T1 представляет собой химерный (слитный) ген, который образуется в кроветворных клетках при транслокации t(8;21)(q22;q22): участок гена RUNX1 с 21-й хромосомы соединяется с геном RUNX1T1 на 8-й хромосоме. Ген RUNX1 кодирует транскрипционный фактор комплекса core-binding factor, который управляет созреванием клеток крови. Химерный белок RUNX1-RUNX1T1 нарушает работу этого комплекса и подавляет нормальную программу дифференцировки миелоидных предшественников. В результате незрелые клетки (бласты) теряют способность к созреванию, продолжают делиться и вытесняют нормальное кроветворение, что приводит к развитию острого миелоидного лейкоза. Исследование выявляет химерный транскрипт RUNX1-RUNX1T1 в лейкозных клетках костного мозга или крови; этот транскрипт присутствует только в опухолевом клоне и отсутствует в здоровых клетках, поэтому его обнаружение однозначно указывает на наличие перестройки.

Молекулярно-генетическое исследование мутаций в гене RUNX1-RUNX1T1 методом ПЦР применяется прежде всего при первичной диагностике острого миелоидного лейкоза. Обнаружение химерного транскрипта позволяет отнести заболевание к отдельному варианту, острому миелоидному лейкозу с t(8;21)(q22;q22)/RUNX1-RUNX1T1, который в современных классификациях выделяется по генетическому признаку: диагноз этого варианта может быть установлен даже при доле бластов ниже стандартного порога. Такое уточнение имеет прямые практические последствия. Лейкозы с RUNX1-RUNX1T1 относятся к группе благоприятного прогноза по международной стратификации риска: они чаще отвечают на стандартную химиотерапию и реже требуют трансплантации костного мозга в первой ремиссии. Результат исследования сопоставляется с данными морфологического, иммунофенотипического и цитогенетического обследования и учитывается при выборе программы лечения и оценке ожидаемого ответа на терапию.

После достижения ремиссии тот же химерный транскрипт служит индивидуальной молекулярной меткой опухолевого клона и используется для контроля минимальной остаточной болезни. Количественное определение уровня RUNX1-RUNX1T1 в динамике показывает, насколько глубоко подавлен лейкозный клон: выраженное снижение уровня транскрипта после индукционной и консолидирующей терапии связано с меньшей вероятностью рецидива, а повторный рост указывает на молекулярный рецидив еще до появления гематологических признаков возврата болезни. При интерпретации учитывается, что у части пациентов в длительной стойкой ремиссии транскрипт может определяться на очень низком уровне, поэтому клиническое значение имеет динамика показателя в серии измерений, а не единичный слабоположительный результат. Такой мониторинг рекомендован современными гематологическими руководствами именно для лейкозов с этой перестройкой и позволяет своевременно скорректировать тактику наблюдения и лечения.