Молекулярно-генетическое исследование мутаций в гене PML-RARA методом ПЦР

Молекулярно-генетическое исследование мутаций в гене PML-RARA методом ПЦР выявляет химерный (слитный) ген PML-RARA, который образуется в результате транслокации t(15;17)(q24;q21): фрагмент гена PML на 15-й хромосоме соединяется с геном рецептора ретиноевой кислоты RARA на 17-й хромосоме. Слитный белок, кодируемый этим геном, блокирует нормальное созревание клеток-предшественников гранулоцитов, и в костном мозге накапливаются опухолевые промиелоциты. Такая перестройка является генетической основой острого промиелоцитарного лейкоза (ОПЛ) и присутствует только в опухолевых клетках, поэтому исследование обнаруживает специфический транскрипт химерного гена в клетках крови или костного мозга пациента.

Обнаружение транскрипта PML-RARA подтверждает диагноз острого промиелоцитарного лейкоза на молекулярном уровне. Быстрое подтверждение критично: ОПЛ в дебюте часто сопровождается тяжёлыми, угрожающими жизни нарушениями свёртывания крови, а лечение этой формы лейкоза принципиально отличается от терапии других вариантов острого миелоидного лейкоза. Именно белок PML-RARA служит мишенью для полностью транс-ретиноевой кислоты (третиноина) и триоксида мышьяка: эти препараты вызывают разрушение химерного белка и дозревание опухолевых клеток, что обеспечивает высокую частоту излечения. Положительный результат исследования служит основанием для назначения такой таргетной терапии, отрицательный результат при морфологической картине, похожей на ОПЛ, указывает на другой вариант лейкоза с иными перестройками и иной лечебной тактикой. При первичном исследовании также определяется вариант точки разрыва в гене PML (тип транскрипта), который затем используется как индивидуальная мишень при последующем молекулярном наблюдении.

После завершения основного лечения то же исследование применяется для оценки минимальной остаточной болезни. Достижение молекулярной ремиссии, то есть исчезновения транскрипта PML-RARA к окончанию консолидирующей терапии, является признанной целью лечения ОПЛ. Повторное появление транскрипта у пациента в ремиссии расценивается как молекулярный рецидив: он опережает клинический и гематологический рецидив и служит основанием для возобновления терапии до развития развёрнутой картины болезни. Молекулярное наблюдение особенно значимо у пациентов группы высокого риска, у которых вероятность возврата заболевания выше. Результат исследования всегда сопоставляется с клинической картиной, данными анализа крови и исследования костного мозга.