Исследование микрофлоры кишечника культуральным методом (дисбактериоз)
Информация об исследовании
Кишечная микробиота представляет собой сообщество микроорганизмов, постоянно населяющих пищеварительный тракт и участвующих в переработке пищевых субстратов, образовании ряда метаболитов, поддержании защитных свойств слизистой и устойчивости кишечника к колонизации патогенными бактериями. Состав этого сообщества неоднороден и зависит от возраста, питания, состояния кишечника и лекарственных воздействий. Культуральное исследование кала определяет количество жизнеспособных бактерий и грибов, способных расти в предусмотренных условиях, и позволяет сопоставить содержание отдельных представителей микрофлоры с возрастными референсными значениями. Результат показывает количественные изменения исследуемых групп микроорганизмов, избыточный рост отдельных условно-патогенных бактерий и наличие ряда кишечных патогенов. В лабораторном бланке результаты для количественно определяемых микроорганизмов представлены с указанием референсных диапазонов и их оценки с учётом возраста.
Состав исследования
В исследование входят бифидобактерии, молочнокислые бактерии, типичная, гемолитическая и лактозонегативная Escherichia coli , бактероиды, клостридии и энтерококки. Отдельно определяется широкий спектр условно-патогенных микроорганизмов, включая представителей Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Proteus, Morganella, Providencia, Pseudomonas, Acinetobacter, Staphylococcus и дрожжевые грибы рода Candida . Также оценивается наличие Yersinia enterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis , возбудителей сальмонеллёза и бактерий дизентерийной группы.
Клиническое значение
При изменениях стула, вздутии живота, дискомфорте и других кишечных симптомах исследование позволяет определить количественное соотношение отдельных групп культивируемой микрофлоры и выявить выраженные отклонения от возрастных референсных значений. Снижение содержания бифидобактерий, молочнокислых бактерий, типичной E. coli или энтерококков характеризует уменьшение их представительства в исследуемом образце, тогда как увеличение отдельных условно-патогенных микроорганизмов указывает на их избыточный рост. Такие изменения оценивают в совокупности, поскольку отклонение одного показателя не устанавливает причину кишечных симптомов и не характеризует состояние микробиоты целиком.
Условно-патогенные бактерии способны присутствовать в кишечнике без клинических проявлений, поэтому их обнаружение само по себе не означает инфекционное заболевание. Диагностическая оценка зависит от количества выделенного микроорганизма, сочетания с другими изменениями микрофлоры и клинической картины. Это особенно важно для энтеробактерий, стафилококков, неферментирующих грамотрицательных бактерий и грибов рода Candida , для которых количественное превышение референсного уровня имеет иное значение, чем простое присутствие в образце. В представленном бланке для большинства таких микроорганизмов установлен количественный порог, ниже которого результат относится к референсному диапазону.
Выявление кишечных патогенов интерпретируется отдельно от количественных изменений обычной микрофлоры. Для Yersinia enterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis , возбудителей сальмонеллёза и бактерий дизентерийной группы референсным результатом является отсутствие микроорганизма. Их обнаружение указывает на присутствие соответствующего инфекционного агента в исследуемом материале и требует сопоставления с симптомами острой или затяжной кишечной инфекции.
Культуральное исследование характеризует только те микроорганизмы, которые входят в состав панели и способны расти в используемых условиях. Поэтому нормальные значения исследуемых показателей не исключают изменений других представителей кишечной микробиоты, которые данным анализом не определяются. Эта особенность особенно важна при интерпретации результата как характеристики конкретного набора культивируемых микроорганизмов, а не всего кишечного микробного сообщества.
Что влияет на результат
Антибактериальные препараты и кишечные антисептики подавляют чувствительные к ним микроорганизмы и снижают их количество в посеве, одновременно изменяя соотношение остальных представителей культивируемой микрофлоры. Пробиотики способны повышать количество микроорганизмов, соответствующих входящим в их состав штаммам, и тем самым изменять количественную картину исследования. Слабительные препараты и интенсивная подготовка кишечника ускоряют выведение содержимого и уменьшают время контакта микроорганизмов с кишечной средой, поэтому количественное соотношение бактерий в кале после такого воздействия способно отличаться от обычного состояния.
Когда назначают анализ
- Стойкие или повторяющиеся нарушения стула, метеоризм, дискомфорт и другие кишечные симптомы.
- Оценка изменений культивируемой кишечной микрофлоры после антибактериальной терапии.
- Длительное восстановление функции кишечника после перенесённой кишечной инфекции.
- Подозрение на избыточный рост условно-патогенных бактерий или дрожжевых грибов.
- Необходимость количественной оценки отдельных представителей кишечной микрофлоры относительно возрастных референсных значений.
- Подозрение на инфекцию, вызванную кишечными патогенами, входящими в состав исследования.
- Контроль ранее выявленных выраженных количественных изменений культивируемой микрофлоры
Как подготовиться к анализу
- Исследование проводят до начала приёма противомикробных препаратов и иммуномодуляторов либо через 12–14 дней после окончания их применения. За 3–4 дня до исследования исключают слабительные препараты, касторовое и вазелиновое масло, ректальные свечи. Самостоятельно отменять назначенные лекарственные препараты не следует.
- За 1–3 дня до сбора материала рекомендуется исключить алкоголь, кисломолочные продукты и пищу, значительно усиливающую процессы брожения в кишечнике. Приём пробиотиков и других бактерийных препаратов также способен повлиять на результат исследования.
- Для анализа необходим кал, полученный после самостоятельной дефекации, без применения клизмы и слабительных средств. Материал собирают в стерильный одноразовый контейнер с ложечкой в количестве не более 1/3 его объёма. Следует исключить попадание в образец мочи, воды и отделяемого половых органов. Материал из унитаза для исследования не используют.
- Кал должен быть свежесобранным. Контейнер доставляют в медицинский офис в течение 3 часов после дефекации. До доставки материал хранят при температуре +2…+8 °C, не замораживая.
Вопросы и ответы
Культуральное исследование оценивает количественный и качественный состав микрофлоры кала путём посева биоматериала на питательные среды с последующей идентификацией выросших колоний. Метод позволяет выявить представителей облигатной флоры (бифидобактерии, лактобактерии, кишечная палочка), факультативной и условно-патогенной флоры (стафилококки, клебсиеллы, протей, грибы рода Candida), а также патогенные энтеробактерии. Результат отражает соотношение групп микроорганизмов, что используется для характеристики микробиоценоза кишечника.
Поводом для назначения культурального исследования микробиоценоза кишечника обычно служат длительные нарушения стула, метеоризм, боли в животе, кожные проявления неясного генеза, состояния после антибактериальной терапии, кишечные инфекции в анамнезе. Клиническую целесообразность определяет гастроэнтеролог, инфекционист или педиатр с учётом анамнеза, симптоматики и сопутствующих заболеваний. Результат посева рассматривается совместно с клинической картиной и данными других исследований кишечника.
Культуральный метод основан на выращивании живых микроорганизмов на питательных средах, тогда как ПЦР-диагностика выявляет фрагменты ДНК бактерий независимо от их жизнеспособности. Посев позволяет получить изолят для последующего определения чувствительности к антибактериальным препаратам и бактериофагам, что недоступно при молекулярном исследовании. ПЦР-методики охватывают более широкий спектр некультивируемых форм, но не дают возможности оценить функциональную активность выделенных штаммов. Методы рассматриваются как взаимодополняющие в диагностическом алгоритме.
Результат культурального исследования сам по себе не служит самостоятельным критерием постановки диагноза, поскольку понятие «дисбактериоз» не относится к самостоятельным нозологическим единицам согласно действующим клиническим рекомендациям. Изменение состава микрофлоры кала совместимо с различными состояниями — от транзиторных нарушений после кишечной инфекции до хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта. Интерпретация проводится лечащим врачом с учётом симптомов, анамнеза, данных эндоскопических и лабораторных исследований.
Спектр выявляемых микроорганизмов включает облигатную анаэробную флору (бифидобактерии, лактобактерии, бактероиды), типичную и атипичную кишечную палочку, энтерококки, условно-патогенные энтеробактерии (клебсиелла, протей, энтеробактер, цитробактер), неферментирующие грамотрицательные бактерии, стафилококки (включая золотистый), стрептококки, дрожжеподобные грибы рода Candida. Дополнительно оценивается наличие патогенных энтеробактерий — сальмонелл и шигелл. Для выделенных условно-патогенных культур обычно определяется чувствительность к антибактериальным препаратам и бактериофагам.
Длительность культурального исследования микробиоценоза кишечника обусловлена биологическими особенностями метода: для роста колоний на питательных средах, их идентификации и количественного учёта требуется несколько суток инкубации. Конкретный срок выполнения по данному тесту указан в карточке исследования и может включать дополнительное время при необходимости определения чувствительности выделенных штаммов к антибактериальным препаратам и бактериофагам.
Стоимость исследования
биоматериала 0 ₽
биоматериала 0 ₽