Инбиофлор. Типирование грибов рода кандида, методом ПЦР

Исследование предназначено для раздельного выявления ДНК видов Candida, отличных от Candida albicans, в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом ПЦР. Панель используется для видового типирования грибковой находки и помогает уточнить причину урогенитального кандидоза при повторяющемся, осложнённом или сохраняющемся течении заболевания. Candida albicans вызывает большинство случаев вульвовагинального кандидоза. Другие виды встречаются реже, однако их доля возрастает при рецидивирующих эпизодах, отсутствии ожидаемого эффекта от ранее проведённой терапии и у пациенток с состояниями, нарушающими иммунную защиту. Разные виды Candida отличаются биологическими свойствами и ожидаемой чувствительностью к противогрибковым препаратам, поэтому их раздельное определение имеет самостоятельное клиническое значение. Грибы рода Candida способны присутствовать на слизистой урогенитального тракта без признаков заболевания. При развитии кандидоза грибковая колонизация сопровождается местной воспалительной реакцией, которая может проявляться зудом, жжением, болезненностью, отёчностью, изменением характера выделений, наружной дизурией и дискомфортом при половом контакте. Результат типирования оценивают вместе с клиническими проявлениями и данными других лабораторных исследований. Панель может применяться после положительного результата общего показателя Fungi и отрицательного результата на Candida albicans. В этой ситуации она уточняет, связан ли обнаруженный грибковый материал с одним из шести включённых видов Candida. Исследование также используют при рецидивирующем кандидозе, который характеризуется тремя и более симптомными эпизодами в течение 12 месяцев, а также при атипичной клинической картине и сохраняющихся симптомах.

Шесть видов, составляющих панель, имеют различающиеся клинические профили.

• Candida glabrata — наиболее частый возбудитель вульвовагинального кандидоза среди видов Candida, отличных от C. albicans.
• Candida krusei — возбудитель с природной устойчивостью к флуконазолу, встречается реже, чем C. glabrata, но при выявлении определяет принципиальный пересмотр терапевтической тактики.
• Candida parapsilosis — клинически значимый возбудитель, в большей степени ассоциированный с инвазивными формами кандидозной инфекции, с поражениями кожи и ногтей, с внутрибольничными инфекциями.
• Candida tropicalis — возбудитель с широким клиническим спектром, от поверхностных инфекций до инвазивных форм у иммунокомпрометированных пациентов.
• Candida famata (Debaryomyces hansenii в современной таксономии) и Candida guilliermondii (Meyerozyma guilliermondii) — редкие возбудители с повышенной частотой у иммунокомпрометированных пациентов.

ПЦР и культуральное исследование решают разные диагностические задачи. Молекулярная панель обеспечивает быстрое целевое типирование шести видов Candida. Культуральный метод позволяет выделить жизнеспособный микроорганизм, расширить видовую идентификацию и при необходимости определить чувствительность к противогрибковым препаратам.

Клиническое значение

Общий показатель Fungi выявляет присутствие грибковой ДНК, а отдельный тест на Candida albicans определяет наиболее распространённый вид. При положительном Fungi и отрицательном результате на C. albicans типирующая панель позволяет проверить шесть других видов Candida и установить возможный источник общего грибкового сигнала. Положительный результат подтверждает присутствие ДНК конкретного вида в исследованном биотопе. При сочетании с характерными симптомами и признаками воспаления такая находка поддерживает диагноз кандидоза, связанного с выявленной Candida. Обнаружение микроорганизма без клинических проявлений может соответствовать колонизации слизистой и само по себе не устанавливает заболевание.

Типирование приобретает особое значение при повторяющемся или сохраняющемся течении кандидоза. В этих ситуациях возрастает вероятность обнаружения Candida glabrata и других видов, отличных от C. albicans. Видовой результат помогает установить причину расхождения между клинической картиной и отрицательным тестом на C. albicans, а также объяснить сохранение симптомов после ранее проведённой терапии. Candida glabrata является наиболее частой грибковой находкой среди видов Candida, отличных от C. albicans. Этот вид не образует характерных гиф и псевдогиф, поэтому может оставаться незамеченным при стандартной микроскопии. Видоспецифическая ПЦР позволяет обнаружить C. glabrata при отрицательной или неубедительной микроскопической картине, для этого вида также характерна сниженная чувствительность к некоторым азольным препаратам. Candida krusei встречается реже, но её идентификация имеет отдельное клиническое значение из-за природной устойчивости к флуконазолу. Обнаружение C. glabrata или C. krusei помогает оценить возможные причины устойчивого или повторяющегося течения заболевания. Панель определяет вид Candida, но не чувствительность конкретного микроорганизма к противогрибковым препаратам. Candida parapsilosis и Candida tropicalis реже участвуют в развитии вульвовагинального кандидоза, их обнаружение приобретает значение при совпадении результата с клиническими проявлениями и признаками воспаления. Candida famata и Candida guilliermondii относятся к редким урогенитальным находкам, поэтому их связь с заболеванием требует особенно тщательной клинической оценки.
Одновременное обнаружение нескольких видов указывает на смешанный состав грибковой находки. Качественный формат панели не позволяет установить преобладающий вид и определить количество каждого микроорганизма. При смешанном результате значение каждого компонента оценивают по клинической картине и данным дополнительных исследований.

Отрицательный результат по всем шести видам означает, что их ДНК в исследованном образце не обнаружена. Если показатель Fungi остаётся положительным, а C. albicans и все виды типирующей панели отсутствуют, происхождение грибкового сигнала остаётся неустановленным. Такой результат может быть связан с видом, который не входит в панель, либо с низким содержанием определяемых грибов. При сохраняющихся симптомах видовой состав может быть уточнён культуральным исследованием.

Что влияет на результат

Системные и местные противогрибковые препараты уменьшают содержание Candida в урогенитальном тракте и могут снизить количество определяемой ДНК. ПЦР выявляет генетический материал независимо от жизнеспособности грибов. После противогрибковой терапии ДНК может некоторое время сохраняться в образце, поэтому положительный результат в этот период не всегда отражает продолжающийся активный процесс. Интравагинальные антисептики, кремы, свечи и другие местные средства изменяют состав исследуемого материала и способны повлиять на результат. Достоверность исследования зависит от локализации, техники взятия и количества полученного материала. Неоднородное распределение грибов по поверхности слизистой может приводить к различиям между образцами из разных участков.