Инбиофлор. ПЦР скрининг патогенных микоплазм: Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis в отделяемом урогенитального тракта

Исследование выявляет три условно-патогенных микроорганизма в урогенитальном тракте.  Методом ПЦР в соскобе эпителия урогенитального тракта определяется наличие или отсутствие ДНК трёх условно-патогенных микроорганизмов: Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum и Mycoplasma hominis. Результат по каждому возбудителю выдаётся отдельно в полуколичественном формате с указанием уровня обнаруженной бактериальной ДНК относительно порогового значения. Панель включает контроль взятия материала, подтверждающий, что соскоб выполнен корректно и содержит достаточное количество эпителиальных клеток. ПЦР обладает преимуществами перед культуральными методами: микоплазмы и уреаплазмы лишены клеточной стенки, не окрашиваются по Граму, не выявляются стандартными бактериологическими посевами, а их культивирование требует специальных сред и занимает от 2 до 5 дней. ПЦР также позволяет дифференцировать U. urealyticum и U. parvum, что невозможно при культуральном исследовании.

Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum и Mycoplasma hominis принадлежат к классу Mollicutes — уникальной группе бактерий, лишённых клеточной стенки. Отсутствие клеточной стенки обусловливает их невидимость при стандартной микроскопии и природную устойчивость к бета-лактамным антибиотикам (пенициллины, цефалоспорины), механизм действия которых основан на нарушении синтеза клеточной стенки.

Все три микроорганизма являются условно-патогенными обитателями урогенитального тракта. Это означает, что они входят в состав нормальной или транзиторной микрофлоры и в большинстве случаев присутствуют без каких-либо клинических проявлений. Частота бессимптомного носительства высока: уреаплазмы обнаруживаются у 40–80% сексуально активных женщин, M. hominis — у 20–50%. Этим они принципиально отличаются от облигатных патогенов (Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium), обнаружение которых всегда расценивается как инфекция и требует лечения. Передача происходит преимущественно половым путём, а также вертикально — от матери к ребёнку при прохождении через родовые пути.

При определённых условиях — нарушении микробиоценоза, снижении местного иммунитета, массивной колонизации — эти микроорганизмы способны участвовать в развитии воспалительных процессов. U. urealyticum ассоциирован с негонококковым уретритом у мужчин (преимущественно при высокой бактериальной нагрузке), M. hominis — с бактериальным вагинозом и послеродовой лихорадкой. Однако для всех трёх микроорганизмов причинно-следственная связь между обнаружением и заболеванием остаётся предметом научной дискуссии, а доказательная база значительно слабее, чем для облигатных возбудителей ИППП.

Клиническое значение

Интерпретация результатов данного исследования требует принципиально иного подхода, чем при тестировании на облигатные патогены. Действующие международные клинические рекомендации не поддерживают рутинное тестирование и лечение U. urealyticum, U. parvum и M. hominis ни у бессимптомных лиц, ни у большинства пациентов с симптомами воспаления — до тех пор, пока не исключены облигатные возбудители ИППП. Высокая частота бессимптомного носительства, слабая доказательная база причинной роли и риск гипердиагностики с избыточным назначением антибиотиков ограничивают клиническую ценность широкого скрининга на эти микроорганизмы.

Показания к исследованию ограничены узкими клиническими ситуациями. У мужчин с персистирующим уретритом, когда Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium и Trichomonas vaginalis исключены, а симптомы сохраняются, обнаружение U. urealyticum при высокой бактериальной нагрузке может рассматриваться как возможный этиологический фактор. Тестирование в этой ситуации допустимо только после исключения всех других причин и под наблюдением специалиста. У женщин показания ещё более ограничены: M. hominis может обнаруживаться при бактериальном вагинозе, однако его самостоятельная роль как возбудителя не доказана, и рекомендации не поддерживают рутинное тестирование.

Ассоциация U. urealyticum и M. hominis с неблагоприятными исходами беременности (преждевременные роды, преждевременный разрыв плодных оболочек, хориоамнионит) описана в ряде исследований, однако причинно-следственная связь не установлена. Действующие рекомендации не поддерживают рутинный скрининг беременных на эти микроорганизмы и не рассматривают лечение бессимптомного носительства при беременности как доказанный метод профилактики осложнений. При отягощённом акушерском анамнезе решение о целесообразности тестирования принимается лечащим врачом индивидуально, с учётом ограниченности доказательной базы.

Дифференциация U. urealyticum и U. parvum, которую обеспечивает данная панель, может представлять дополнительный интерес: по имеющимся данным, U. parvum чаще обнаруживается при бессимптомном носительстве, тогда как U. urealyticum несколько чаще ассоциирован с симптоматическими инфекциями. Однако действующие рекомендации не рассматривают видовую дифференциацию как самостоятельный критерий для принятия решений о лечении.

У пациентов с выраженным иммунодефицитом (реципиенты трансплантатов, пациенты на интенсивной иммуносупрессивной терапии) M. hominis может вызывать тяжёлые экстрагенитальные инфекции: септический артрит, раневые инфекции, гипераммониемию. В этих редких, но клинически значимых ситуациях обнаружение M. hominis приобретает диагностическое значение.

Панель не включает Mycoplasma genitalium — облигатный патоген с установленной ролью в уретритах и цервицитах, для которого существуют чёткие рекомендации по диагностике и лечению. При подозрении на M. genitalium необходимо отдельное исследование. Обнаружение условно-патогенных микоплазм не исключает сопутствующего инфицирования облигатными возбудителями, и комплексное обследование на ИППП (хламидии, гонококк, трихомонады, M. genitalium) должно предшествовать интерпретации результатов данной панели.

Таким образом, ПЦР-скрининг на U. urealyticum, U. parvum и M. hominis имеет ограниченные клинические показания. Исследование может быть информативным при персистирующем негонококковом нехламидийном уретрите у мужчин после исключения всех облигатных возбудителей и при обследовании иммунокомпрометированных пациентов с подозрением на M. hominis-ассоциированную инфекцию. Обнаружение этих микроорганизмов при отсутствии симптомов воспаления не является показанием к лечению. Назначение антибактериальной терапии исключительно на основании положительного результата ПЦР без клинических проявлений сопряжено с риском формирования антибиотикорезистентности и не поддерживается действующими рекомендациями.

Ограничения

Обнаружение ДНК U. urealyticum, U. parvum или M. hominis подтверждает присутствие микроорганизма в урогенитальном тракте, но в большинстве случаев отражает бессимптомное носительство, а не активное заболевание. Все три возбудителя обнаруживаются у значительной части клинически здоровых лиц, и положительный результат сам по себе не является показанием к лечению. 
Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии детектируемой ДНК указанных микроорганизмов, но не исключает других причин воспалительных заболеваний урогенитального тракта. Панель не определяет Mycoplasma genitalium, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis — облигатные патогены, обследование на которые должно предшествовать тестированию на условно-патогенные микоплазмы. 
Полуколичественный формат указывает уровень ДНК относительно порогового значения, но не является точным количественным определением. Пороговые значения носят ориентировочный характер: результат ниже порога при выраженной клинической картине не исключает этиологической роли возбудителя, а превышение порога без симптомов не является достаточным основанием для лечения. 
Качество преаналитического этапа критически влияет на достоверность результата. Неправильная техника забора соскоба, недостаточное количество клеточного материала, приём антибактериальных препаратов, местное применение антисептиков или спермицидов непосредственно перед исследованием могут привести к ложноотрицательным результатам. Контроль взятия материала, включённый в панель, позволяет выявить случаи неадекватного забора. 
Результат исследования требует интерпретации врачом с учётом клинической картины, наличия или отсутствия симптомов воспаления, результатов обследования на облигатные возбудители ИППП, акушерского анамнеза и иммунного статуса пациента.