Для врача 
Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование при диагностике лимфопролиферативных заболеваний, парафиновый блок
Информация об исследовании
Иммуногистохимическое исследование выявляет в ткани белковые молекулы, характерные для определенных типов клеток и стадий их созревания. Материалом служит парафиновый блок: фрагмент лимфатического узла, костного мозга или другой ткани, полученный при биопсии, зафиксированный и залитый в парафин. На срезы наносят антитела к дифференцировочным антигенам лимфоцитов (CD20, CD3, CD5, CD10, CD23, CD30 и другим), белкам регуляции клеточного цикла и апоптоза (циклин D1, BCL2, BCL6), маркеру пролиферативной активности Ki-67. Каждый нормальный лимфоцит несет набор антигенов, соответствующий его линии (B-клеточной, T-клеточной, NK-клеточной) и этапу развития. Опухоль, возникшая из одного клона лимфоцитов, сохраняет и нередко искажает этот набор: клетки экспрессируют антигены в аномальных сочетаниях, теряют одни белки и приобретают другие. Такой иммунофенотип становится своеобразным «портретом» опухоли, который читается непосредственно на гистологическом срезе, с сохранением архитектуры ткани.
Исследование выполняется, когда по данным гистологического исследования заподозрено лимфопролиферативное заболевание: лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, лейкоз с поражением тканей. По одной морфологии разные лимфомы часто неотличимы друг от друга и от реактивного увеличения лимфоузла при инфекции или воспалении, поэтому современная классификация опухолей лимфоидной ткани требует обязательного иммунофенотипирования. Панель антител позволяет установить линейную принадлежность опухолевых клеток (B- или T-клеточная лимфома), отличить лимфому Ходжкина с ее характерным фенотипом клеток Березовского–Штернберга (CD30, CD15 при отсутствии CD45) от крупноклеточных неходжкинских лимфом, а внутри B-клеточных опухолей разграничить конкретные варианты: экспрессия циклина D1 указывает на лимфому из клеток мантийной зоны, сочетание CD10 и BCL6 характерно для фолликулярной лимфомы, коэкспрессия CD5 и CD23 типична для хронического лимфолейкоза. Аномальная экспрессия BCL2 в фолликулярных структурах помогает отличить фолликулярную лимфому от реактивной гиперплазии фолликулов. Индекс Ki-67 отражает долю делящихся клеток и используется для разграничения индолентных и агрессивных вариантов, в частности при подозрении на лимфому Беркитта. В результате исследование дает точный нозологический диагноз в соответствии с классификацией ВОЗ, без которого невозможно спланировать лечение.
Помимо установления диагноза, иммунофенотип определяет тактику терапии и прогноз. Подтвержденная экспрессия CD20 на опухолевых клетках служит основанием для назначения анти-CD20-терапии (ритуксимаб и его аналоги), экспрессия CD30 учитывается при выборе таргетного лечения лимфомы Ходжкина и анаплазированной крупноклеточной лимфомы. При диффузной B-крупноклеточной лимфоме сочетание маркеров CD10, BCL6 и MUM1 позволяет отнести опухоль к герминальному или негерминальному подтипу, что связано с различиями в прогнозе. Иммуногистохимия применяется и при рецидиве: сравнение фенотипа с первичной опухолью помогает подтвердить возврат того же заболевания или выявить трансформацию индолентной лимфомы в агрессивную. Результат всегда оценивается как совокупная картина: ни один маркер в отдельности диагноз не устанавливает, заключение формируется по всей панели в сопоставлении с морфологией среза и клиническими данными.
Когда назначают анализ
- Морфологическое подозрение на лимфопролиферативное заболевание в биоптате лимфатического узла, костного мозга или экстранодальной ткани: исследование подтверждает опухолевую природу процесса и устанавливает вариант лимфомы согласно действующей классификации ВОЗ.
- Увеличение лимфатических узлов с неоднозначной гистологической картиной: иммунофенотипирование клеток инфильтрата помогает разграничить реактивную лимфоидную гиперплазию и лимфому.
- Низкодифференцированная опухоль неясного происхождения: панель маркеров позволяет отличить лимфому от карциномы, меланомы и других новообразований со сходной морфологией.
- Установленный диагноз лимфомы: оценка экспрессии терапевтических мишеней (CD20, CD30) и прогностических характеристик (индекс пролиферации Ki-67, подтип диффузной В-крупноклеточной лимфомы по клетке происхождения), результаты учитываются при выборе тактики лечения.
- Подозрение на рецидив или трансформацию ранее диагностированной лимфомы (например, синдром Рихтера при хроническом лимфолейкозе): сопоставление иммунофенотипа нового очага с первичной опухолью подтверждает связь процессов.
Как подготовиться к анализу
Иммуногистохимическое исследование для диагностики лимфопролиферативных заболеваний проводится на биологическом материале, который уже зафиксирован и заключён в парафиновый блок. Это означает, что этап взятия ткани (биопсия) уже позади, а подготовка касается прежде всего правильного обращения с готовым образцом. Тем не менее существуют важные требования, соблюдение которых обеспечит достоверность результата.
Общие требования:
- Для исследования необходимо предоставить парафиновый блок с биоматериалом, полученным при биопсии лимфатического узла, костного мозга или другой ткани, в которой подозревается лимфопролиферативный процесс.
- Вместе с блоком желательно передать готовые гистологические стёкла, окрашенные гематоксилином и эозином, а также копию имеющегося гистологического заключения.
- Парафиновый блок должен быть промаркирован: на нём указывается фамилия пациента, номер и дата биопсии. Убедитесь, что маркировка читаема.
- Специальной подготовки пациента в день сдачи материала не требуется, поскольку исследование выполняется на ранее заготовленном образце.
Диета:
- Диетические ограничения для данного вида исследования не предусмотрены. Анализ проводится на тканевом образце, и характер питания пациента не влияет на его результат.
Лекарственные препараты:
- Если пациент получает или ранее получал химиотерапию, таргетную терапию, глюкокортикостероиды или иммуносупрессивные препараты, необходимо сообщить об этом лечащему врачу и указать в направлении. Эти сведения могут быть важны для корректной интерпретации иммуногистохимического профиля опухоли.
- Отмена текущей лекарственной терапии перед передачей блока в лабораторию не требуется.
Другие ограничения:
- Ограничения по физической активности, курению и употреблению алкоголя для данного исследования отсутствуют, так как оно не связано с забором крови или иных жидких биосред.
- Парафиновый блок следует транспортировать при комнатной температуре, не допуская нагревания выше 40 °C, прямого солнечного света и механических повреждений. Избыточное тепло способно деформировать парафин и повредить ткань внутри него.
- Обратите внимание: чем раньше после первичного гистологического исследования будет выполнено ИГХ, тем выше качество реакции с антителами. Длительное хранение блока может снижать иммунореактивность ткани.
Стоимость исследования
биоматериала 0 ₽