Флюоресцентная гибридизация In situ (FISH) (цена за один зонд)

Флюоресцентная гибридизация in situ (FISH) выявляет конкретные участки ДНК непосредственно в ядрах опухолевых клеток. Зонд представляет собой меченый фрагмент ДНК, который связывается только с исследуемым участком генома, и его свечение видно под микроскопом в каждой отдельной клетке. Метод показывает число копий гена и его положение на хромосоме, поэтому обнаруживает амплификацию (умножение копий), делецию (утрату участка) и транслокацию или перестройку (перенос фрагмента на другую хромосому). Такие изменения возникают в опухолевых клетках в ходе злокачественной трансформации, запускают избыточные сигналы роста и нередко определяют чувствительность опухоли к таргетным препаратам. Исследование выполняется на срезах опухолевой ткани или на цитологическом материале: сохранённая структура образца позволяет оценивать именно опухолевые клетки и отличать истинную аномалию от примеси нормальной ткани. Каждый зонд отвечает на один вопрос об одном участке генома, поэтому услуга тарифицируется за отдельный зонд, а объём исследования определяется конкретной клинической задачей.

Наиболее частая задача FISH в онкологии связана с оценкой статуса гена HER2 при раке молочной железы и раке желудка. Амплификация HER2 приводит к избытку одноимённого рецептора на поверхности клеток, что ускоряет рост опухоли и одновременно делает её мишенью для анти-HER2 терапии, например трастузумаба. Зонды к гену HER2 и к центромере 17-й хромосомы позволяют подсчитать число копий гена в клетке и их соотношение, на основании которого опухоль относят к HER2-положительным или HER2-отрицательным. Этот результат непосредственно учитывается при выборе лечения: таргетная терапия эффективна только при подтверждённой амплификации. FISH особенно востребована при пограничных результатах иммуногистохимического окрашивания (HER2 2+), когда по уровню белка однозначный вывод сделать нельзя и требуется прямой подсчёт копий гена.

Второе крупное направление связано с поиском перестроек генов, создающих химерные онкогены. При немелкоклеточном раке лёгкого зонды к генам ALK, ROS1 и RET выявляют транслокации, при которых опухоль отвечает на ингибиторы соответствующих киназ. В диагностике лимфом FISH обнаруживает перестройки MYC, BCL2 и BCL6, которые разграничивают агрессивные варианты и влияют на выбор схемы лечения, а при саркомах и ряде опухолей мягких тканей характерные транслокации подтверждают конкретный гистологический диагноз. В онкогематологии зонды к отдельным делециям и транслокациям используются при хроническом лимфолейкозе, множественной миеломе и острых лейкозах для уточнения прогноза и стратификации терапии. Во всех этих ситуациях результат по каждому зонду интерпретируется вместе с гистологической картиной и клиническими данными: обнаруженная аномалия подтверждает конкретный молекулярный вариант опухоли, а её отсутствие направляет поиск к другим генетическим механизмам.