Фемофлор 8: пцр исследование микрофлоры урогенитального тракта у женщин

Исследование оценивает микробный баланс влагалища в одном анализе. Тест определяет соотношение нормальной флоры (лактобацилл) и условно-патогенных микроорганизмов, выявляя нарушение баланса — дисбиоз.  Фемофлор 8 — сокращённая панель оценки влагалищной микрофлоры для первичной диагностики дисбиотических нарушений и выявления основных условно-патогенных микроорганизмов. Исследование выполняется методом ПЦР в соскобе эпителия урогенитального тракта и используется для этиологической диагностики инфекционно-воспалительных заболеваний репродуктивной системы. Количество каждой группы микроорганизмов сопоставляется с общей бактериальной массой и выражается как процентная доля в сообществе. Для условно-патогенной флоры, которая присутствует и в норме, клинически значимо не её обнаружение, а вес в микробиоценозе. Тест-система формирует заключение о соответствии нормоценозу, умеренном или выраженном дисбиозе. Большинство анаэробных бактерий, формирующих патологические сообщества при дисбиозе, в рутинной культуре не растут из-за чувствительности к кислороду. ПЦР определяет их ДНК напрямую и даёт общую картину биоценоза в рамках базовой панели показателей.

Состав исследования

Панель охватывает 8 клинически значимых показателей и два контрольных параметра. Контроль взятия материала (КВМ) подтверждает адекватность забора по количеству геномной ДНК человека. Общая бактериальная масса (ОБМ) отражает суммарное количество бактерий и служит знаменателем для расчёта доли каждого микроорганизма в сообществе.

Нормофлора — количественно, с расчётом доли от ОБМ: 
— Lactobacillus spp.

Факультативно-анаэробные условно-патогенные микроорганизмы — количественно, с расчётом доли от ОБМ: 
— семейство Enterobacteriaceae 
— Streptococcus spp.

Облигатно-анаэробные условно-патогенные микроорганизмы — количественно, с расчётом доли от ОБМ: 
— Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 
— Eubacterium spp.

Дрожжеподобные грибы и микоплазмы — абсолютный количественный формат: 
— Candida spp. 
— Mycoplasma hominis

Патогенные микроорганизмы — формат обнаружено / не обнаружено: 
— Mycoplasma genitalium

У здоровой женщины репродуктивного возраста во влагалищной микрофлоре доминируют лактобациллы — на них приходится 85–100 % общей бактериальной массы. Они поддерживают кислую среду (pH 3,8–4,5) за счёт молочной кислоты и перекиси водорода, сдерживая рост условно-патогенных микроорганизмов и облигатных патогенов. Состав биоценоза зависит от уровня эстрогенов: в репродуктивном возрасте гормональный фон поддерживает накопление гликогена в эпителии и доминирование лактобацилл, в постменопаузе их доля снижается, при беременности усиливается.

Характер дисбиоза определяется тем, какие микроорганизмы замещают лактобациллы. При анаэробном дисбиозе (бактериальном вагинозе) доминируют облигатные анаэробы, прежде всего Gardnerella vaginalis и Prevotella. При аэробном вагините преобладают энтеробактерии и стрептококки на фоне сниженных лактобацилл; в отличие от бактериального вагиноза, он протекает с истинной воспалительной реакцией и гнойными выделениями. Встречаются смешанные формы и сочетание дисбиоза с кандидозом, требующее комбинированной терапии.

Mycoplasma genitalium — облигатный патоген и требует лечения при любом обнаружении. Mycoplasma hominis относится к условно-патогенной флоре и часто выявляется у клинически здоровых женщин. Базовая панель не включает оценку Atopobium vaginae и ряда других групп облигатных анаэробов, поэтому при рецидивирующем бактериальном вагинозе и неэффективности стандартной терапии целесообразно использовать расширенную версию исследования

Клиническое значение

Фемофлор 8 применяется для объективной оценки состояния вагинального микробиоценоза и этиологической диагностики дисбиотических нарушений. Основным показанием является дифференциальная диагностика причин патологических выделений из влагалища. Клинические проявления бактериального вагиноза, аэробного вагинита и вульвовагинального кандидоза могут перекрываться, а при смешанных формах (вагиноз + кандидоз, вагиноз + аэробный вагинит) клиническая диагностика особенно ненадёжна. Количественная оценка соотношения лактобацилл, анаэробных УПМ (Gardnerella + Prevotella + Porphyromonas, Eubacterium), аэробных УПМ (Enterobacteriaceae, Streptococcus) и Candida в одном тесте позволяет врачу определить, какой тип нарушения преобладает, и обосновать выбор терапии.

При бактериальном вагинозе характерна картина: выраженное снижение Lactobacillus spp. с одновременным увеличением доли облигатных анаэробов (Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Eubacterium spp.). Количественный формат позволяет разграничить нормоценоз (лактобациллы 85–100% от ОБМ), умеренный дисбиоз и выраженный дисбиоз, что влияет на решение о необходимости лечения. При аэробном вагините доминируют факультативно-анаэробные микроорганизмы (Enterobacteriaceae, Streptococcus spp.) на фоне сниженных лактобацилл. Различение бактериального вагиноза и аэробного вагинита клинически важно, поскольку подходы к лечению различаются. При вульвовагинальном кандидозе определяющим является сочетание повышенного количества Candida spp. с характерными симптомами; обнаружение Candida без симптомов расценивается как носительство.

Исследование востребовано при обследовании беременных. Дисбиотические нарушения вагинальной микрофлоры ассоциированы с повышенным риском осложнений: преждевременных родов, преждевременного разрыва плодных оболочек, послеродового эндометрита и инфицирования новорождённого. Количественная оценка микробиоценоза позволяет выявить нарушения на субклинической стадии, когда симптомы отсутствуют, но микробный баланс уже сдвинут в сторону условно-патогенной флоры. Однако необходимо учитывать, что скрининг и лечение бессимптомного бактериального вагиноза у беременных с целью профилактики преждевременных родов остаётся предметом дискуссии, и решение принимается акушером-гинекологом индивидуально.

Фемофлор 8 также используется для контроля эффективности терапии дисбиотических нарушений. Повторное тестирование после лечения позволяет оценить восстановление лактобациллярного доминирования и элиминацию избыточной условно-патогенной флоры. Сравнение количественных показателей до и после лечения объективнее, чем клиническая оценка, особенно при рецидивирующем бактериальном вагинозе, где частота рецидивов в течение года достигает 50%.

Обнаружение Mycoplasma genitalium — единственного облигатного патогена в панели — имеет однозначное клиническое значение и требует лечения вне зависимости от симптомов. M. genitalium ассоциирован с цервицитом, уретритом и воспалительными заболеваниями органов малого таза; нарастающая устойчивость к макролидам делает выявление этого возбудителя особенно важным для своевременного и адекватного лечения.

Фемофлор 8 является скрининговой версией теста с базовым набором показателей. Для более детальной оценки микробиоценоза существует расширенная версия — Фемофлор 16, включающая дополнительные группы анаэробных микроорганизмов, уреаплазмы и расширенный спектр патогенов. Выбор между версиями определяется лечащим врачом: Фемофлор 8 достаточен для первичной оценки и скрининга, Фемофлор 16 предпочтителен при рецидивирующих нарушениях, неэффективности стандартной терапии и необходимости более детального анализа анаэробного компонента.

Исследование наиболее информативно при патологических выделениях из влагалища для дифференциации бактериального вагиноза, аэробного вагинита и кандидоза, при обследовании беременных для оценки микробиоценоза, при рецидивирующих вагинальных инфекциях и при контроле эффективности терапии. Рутинное тестирование бессимптомных женщин без акушерских показаний и без жалоб может приводить к обнаружению минимальных отклонений от нормы, клиническая значимость которых при отсутствии симптомов ограничена.

Ограничения

Результаты Фемофлор 8 характеризуют состояние микробиоценоза влагалища на момент забора материала и могут изменяться в зависимости от фазы менструального цикла, гормонального фона, приёма антибиотиков или пробиотиков, половой активности и гигиенических процедур. Однократное исследование даёт «моментальный снимок» микрофлоры; при рецидивирующих нарушениях может потребоваться повторная оценка. 
Панель включает базовый набор из 8 показателей и не охватывает полный спектр условно-патогенной микрофлоры. Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Atopobium cluster, Megasphaera, Sneathia, Leptotrichia и ряд других анаэробов, определяемых в расширенной версии (Фемофлор 16), данной панелью не выявляются. Из облигатных ИППП-патогенов определяется только Mycoplasma genitalium; Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae и Trichomonas vaginalis не входят в панель и при необходимости должны быть исследованы отдельно. 
Обнаружение условно-патогенных микроорганизмов или Candida spp. при отсутствии симптомов, как правило, не является показанием к лечению. Обнаружение M. hominis при отсутствии симптомов расценивается как носительство. 
Качество преаналитического этапа критически влияет на достоверность результата. Забор материала не рекомендуется проводить во время менструации, в течение 24–48 часов после полового контакта, после спринцевания или применения вагинальных свечей, кремов и антисептиков. Приём системных антибактериальных препаратов может искажать результат; рекомендуется проводить исследование не ранее чем через 14 дней после завершения местной и не ранее чем через 1 месяц после завершения системной антибактериальной терапии. 
Результат исследования требует интерпретации врачом-гинекологом с учётом клинической картины, жалоб, возраста и гормонального статуса пациентки, акушерского анамнеза и данных других обследований.