Фагоцитарная активность лейкоцитов, проточная цитофлуориметрия

Фагоцитоз является одним из основных механизмов врождённой иммунной защиты. Нейтрофилы и моноциты распознают чужеродные частицы, поглощают их и направляют во внутриклеточные структуры, где происходит последующая обработка и уничтожение. Нарушение этого процесса может снижать устойчивость организма к бактериальным и грибковым инфекциям. Исследование оценивает способность фагоцитирующих клеток периферической крови захватывать флуоресцентно-меченые частицы в условиях in vitro. После инкубации образца проточный цитофлуориметр определяет долю клеток, участвующих в фагоцитозе, и количество флуоресцентного материала, поглощённого отдельными клетками. Метод позволяет исследовать большое число клеток и раздельно оценивать функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов. Анализ применяют при повторных, тяжёлых или необычно протекающих бактериальных и грибковых инфекциях, подозрении на нарушение функции фагоцитов и выявлении функциональных изменений лейкоцитов на фоне системных заболеваний или лекарственной терапии. Результат помогает определить, сохранена ли способность клеток к поглощению частиц, и выбрать направление дальнейшего иммунологического обследования.

Клиническое значение

Снижение доли фагоцитирующих клеток или количества поглощённого ими материала указывает на ослабление захватывающей способности нейтрофилов или моноцитов в условиях проведённого исследования. Такое изменение может быть связано с первичным функциональным дефектом фагоцитов, тяжёлой инфекцией, выраженным системным воспалением, метаболической декомпенсацией, истощением клеточного резерва или действием лекарственных препаратов. Причину отклонения устанавливают с учётом клинической картины, абсолютного количества и морфологии клеток и результатов других исследований. При повторных бактериальных и грибковых инфекциях тест помогает оценить один из последовательных этапов противомикробной защиты: поглощение чужеродного материала. Выявленное снижение служит основанием для дальнейшего исследования функций нейтрофилов и других компонентов врождённого иммунитета. В зависимости от клинической задачи обследование может включать оценку окислительного взрыва, экспрессии молекул адгезии, направленной миграции клеток, системы комплемента и содержания иммуноглобулинов.

Повышенные показатели могут сопровождать активацию нейтрофилов и моноцитов при инфекции или воспалении. Такое изменение неспецифично и не позволяет установить возбудителя, локализацию воспалительного процесса или тяжесть заболевания. При динамическом наблюдении результат показывает изменение функциональной реакции клеток по сравнению с предыдущими исследованиями, выполненными сопоставимым методом. Фагоцитоз включает несколько этапов, поэтому нормальная способность клеток поглощать частицы не означает сохранности всех механизмов внутриклеточной защиты. Исследование не характеризует направленную миграцию лейкоцитов и отдельно не оценивает образование активных форм кислорода и уничтожение поглощённых микроорганизмов. Для диагностики хронической гранулематозной болезни применяют тест окислительного взрыва с дигидрородамином 123, измеряющий активность НАДФН-оксидазной системы нейтрофилов.

При дефиците адгезии лейкоцитов основное нарушение связано с прикреплением клеток к сосудистому эндотелию и их выходом в ткани, а при синдроме Чедиака — Хигаси с внутриклеточным транспортом и функционированием лизосомальных гранул. Поэтому нормальный результат исследования фагоцитарного захвата не исключает эти и другие дефекты работы нейтрофилов.

Что влияет на результат

Острая инфекция и активное воспаление могут сопровождаться усилением или снижением показателей в зависимости от стадии заболевания, выраженности системной реакции, зрелости циркулирующих клеток и проведённого лечения. При тяжёлой инфекции, сепсисе и декомпенсации хронических заболеваний функциональный ответ фагоцитов также может изменяться. Глюкокортикоиды, цитостатические, иммуносупрессивные и некоторые противоопухолевые препараты способны влиять на количество, созревание и функциональную активность лейкоцитов. Значение имеют действующее вещество, доза, длительность лечения и срок взятия крови относительно введения препарата. Самостоятельно отменять назначенную терапию перед исследованием не следует.