Антителал IgG к вирусу краснухи (Rubella virus) методом иммуноблоттинга в крови

Антитела класса IgG к вирусу краснухи методом иммуноблоттинга направлены против структурных белков вируса с раздельным выявлением антител к отдельным белкам — поверхностным гликопротеинам оболочки E1 и E2 и капсидному белку C. В отличие от стандартного иммуноферментного определения IgG, дающего суммарный результат против всех антигенов вируса, иммуноблоттинг позволяет различить, против каких именно вирусных белков направлены антитела пациента. Это свойство определяет применение метода как уточняющего при сомнительных или противоречивых результатах стандартного скрининга и в специальных клинических ситуациях.

Вирус краснухи — РНК-содержащий вирус с одноцепочечным РНК-геномом положительной полярности, относится к семейству Matonaviridae. Это единственный известный возбудитель краснухи у человека; других хозяев в природе вирус не имеет. Главными мишенями вируса при первичном инфицировании служат эпителиальные клетки слизистой оболочки верхних дыхательных путей и регионарные лимфоидные ткани, через которые вирус проникает в организм и распространяется по кровотоку. Передача происходит воздушно-капельным путём при тесных контактах с инфицированными лицами. У беременных вирус способен преодолевать плацентарный барьер с инфицированием плода и развитием синдрома врождённой краснухи. 
Приобретённая краснуха клинически реализуется как доброкачественное заболевание у иммунокомпетентных детей и взрослых, протекающее с лихорадкой, пятнисто-папулёзной сыпью, лимфаденопатией (особенно затылочной и заушной), артралгией у взрослых женщин. Заболевание разрешается самостоятельно в течение 1–2 недель с последующим формированием пожизненного иммунитета. Врождённая краснуха развивается при первичном инфицировании беременной с трансплацентарной передачей вируса плоду; риск инфицирования плода и тяжесть его поражения обратно пропорциональны сроку беременности на момент инфицирования матери. При инфицировании в первом триместре риск передачи вируса плоду превышает 80% с высокой частотой развития классической триады синдрома врождённой краснухи (катаракта, врождённые пороки сердца, глухота).

Иммуноблоттинг позволяет различить, против каких именно вирусных белков (E1, E2, C) направлены антитела пациента. В отдельных иммуноблот-исследованиях и технических спецификациях коммерческих тест-систем описаны различия в кинетике антител против отдельных белков и закономерности антительного профиля у пациентов после перенесённой инфекции и после вакцинации. Эти наблюдения относятся к специализированным серологическим данным и не имеют статуса жёстко валидированных клинических правил для стандартной интерпретации; оценка отдельных полос может дополнять интерпретацию серологического профиля в специальных клинических ситуациях, но не заменяет стандартные методы подтверждения недавней инфекции (IgM, авидность IgG, парные сыворотки).

Стандартное иммуноферментное определение антител IgG к вирусу краснухи остаётся основным серологическим методом скрининга и оценки иммунного статуса в большинстве клинических ситуаций. Иммуноблоттинг применяется как уточняющий метод при сомнительных или противоречивых результатах стандартного скрининга.

Клиническое значение

Иммуноблоттинг для определения антител IgG к вирусу краснухи помогает решить задачи уточняющей диагностики при сомнительных или противоречивых результатах стандартного иммуноферментного определения IgG. Метод применяется в специальных клинических ситуациях, не входит в обязательные программы скрининга беременных или оценки иммунного статуса при подготовке к беременности и не заменяет стандартное определение IgG в качестве первичного теста.

Главная клиническая ниша метода — разрешение сомнительных результатов стандартного иммуноферментного определения IgG. При получении пограничных, низкоположительных или противоречивых результатов стандартного скрининга (например, противоречие между IgM и IgG, противоречие между результатами разных тест-систем, несогласованность серологических данных с клинической картиной или эпидемиологическим анамнезом) иммуноблоттинг помогает подтвердить или опровергнуть наличие истинно специфических антител. Положительный результат иммуноблоттинга с выявлением антител к нескольким вирусным белкам поддерживает диагноз состоявшегося контакта с вирусом или поствакцинального иммунитета; отрицательный результат при положительном стандартном тесте указывает на вероятный ложноположительный результат скрининга из-за перекрёстной реактивности.

Опорными методами разграничения свежего первичного инфицирования и ранее перенесённой инфекции остаются определение IgM, авидности IgG и парные сыворотки. Оценка антительного профиля методом иммуноблоттинга может предоставить дополнительные данные в специальных клинических ситуациях, однако не заменяет эти стандартные методы и не служит самостоятельным критерием давности инфекции. Связи между отдельными полосами иммуноблоттинга и давностью инфекции описаны в специализированных серологических исследованиях, но не имеют статуса валидированных клинических правил для стандартной интерпретации.

При оценке поствакцинального иммунитета в нетипичных клинических ситуациях (например, при необходимости разграничить поствакцинальный иммунитет от иммунитета после перенесённой инфекции у пациентов с неясным анамнезом) метод имеет ограниченное вспомогательное значение. Дифференциация не имеет жёстких критериев и опирается прежде всего на анамнестическую информацию о вакцинации и перенесённой инфекции; данные иммуноблоттинга могут учитываться, но самостоятельным основанием для разграничения происхождения серологической памяти не служат.

При обследовании пациентов с подозрением на врождённую краснуху определение полного антительного профиля методом иммуноблоттинга может применяться в комплексной оценке наряду со стандартным определением IgG, IgM и при необходимости — определением вирусной РНК методом полимеразной цепной реакции. У детей с подозрением на синдром врождённой краснухи опорными методами лабораторного подтверждения служат определение IgM в крови ребёнка и определение вирусной РНК; иммуноблоттинг применяется как вспомогательный метод в специальных клинических ситуациях.

Ограничения

Иммуноблоттинг не относится к методам первичного скрининга и не применяется для рутинной оценки иммунного статуса перед беременностью или вакцинацией. Опорным методом первичной оценки служит стандартное иммуноферментное определение IgG. 
Положительный результат иммуноблоттинга не разграничивает иммунитет, сформированный после перенесённой краснухи, и поствакцинальный иммунитет. Связи между профилем антител против отдельных вирусных белков (E1, E2, C) и давностью или происхождением иммунитета описаны в специализированных серологических исследованиях, но не имеют статуса жёстко валидированных клинических правил и не позволяют выводить однозначное заключение о клиническом контексте. 
Отрицательный или неполный антительный профиль (отсутствие реакции на отдельные белки) не всегда означает отсутствие защитного иммунитета. У части привитых антительный профиль остаётся неполным, при этом противоинфекционная защита может быть достаточной; у части пациентов после перенесённой инфекции отдельные антитела снижаются и исчезают в отдалённые сроки. 
При интерпретации результатов у беременных иммуноблоттинг не заменяет стандартного скрининга, обязательного согласно действующим клиническим рекомендациям. Решения о тактике ведения беременной с подозрением на свежее первичное инфицирование принимаются на основании комплексной оценки IgM, IgG, авидности IgG, при необходимости — парных сывороток, клинической картины и эпидемиологического анамнеза; иммуноблоттинг применяется как уточняющий метод в специальных клинических ситуациях.