Антитела IgG к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, в т.ч. поствакцинальные (вакцины на основе RBD-домена)

Антитела класса IgG к спайковому (S) белку коронавируса SARS-CoV-2 формируются в ответ на контакт иммунной системы с вирусным антигеном — после перенесённой инфекции или после вакцинации препаратами, использующими в качестве иммуногена рецептор-связывающий домен (RBD) S-белка. Спайковый белок обеспечивает прикрепление вируса к клеточному рецептору ACE2 и проникновение в клетку, поэтому именно к нему направлен основной нейтрализующий гуморальный ответ. IgG появляются позже антител класса M, выходят на плато к концу первого–второго месяца от антигенного стимула и сохраняются в крови месяцами, постепенно снижаясь по титру. Скорость нарастания, абсолютный уровень и длительность циркуляции зависят от тяжести перенесённой инфекции, возраста, исходного состояния иммунитета и схемы вакцинации, включая интервал между дозами и факт ревакцинации.

Клиническая задача теста — подтвердить, что иммунная система выработала специфический ответ против S-белка, и оценить его выраженность в количественном выражении. Такое разделение результата на положительный и отрицательный имеет конкретные следствия: при положительном ответе фиксируется факт состоявшейся встречи с антигеном — постинфекционной либо поствакцинальной, при отрицательном обсуждается вопрос о первичной или повторной вакцинации, особенно у лиц из групп риска. Помимо первичной оценки, тест применяется в динамическом наблюдении: повторное определение через несколько месяцев показывает направление изменения титра, что используется при решении о ревакцинации, при ведении пациентов с иммунодефицитами, после терапии моноклональными антителами и B-клеточно-истощающими препаратами, а также при оценке ответа у реципиентов трансплантатов на фоне иммуносупрессии. Один и тот же показатель работает и как индикатор состоявшегося иммунного ответа, и как ориентир для планирования последующих вмешательств.

Связанные с этим направлением параметры распределяются по антигенным мишеням и классам иммуноглобулинов. Антитела к нуклеокапсидному (N) белку отражают только постинфекционный ответ, поскольку RBD-вакцины N-антиген не содержат; их сопоставление с anti-S IgG позволяет различить вакцинальное и инфекционное происхождение гуморального ответа. Антитела класса IgM к S-белку характеризуют раннюю фазу контакта с антигеном, тогда как IgG отражают зрелый и более длительный ответ. Отдельную группу составляют тесты на нейтрализующие антитела, направленные против взаимодействия RBD с ACE2: они описывают функциональную сторону гуморального иммунитета, тогда как количественный anti-S IgG показывает суммарную концентрацию специфических IgG к спайковому белку независимо от их нейтрализующей активности.

Клиническое значение

Чтение результата идёт на двух уровнях. Статический уровень — это однократно зафиксированный титр anti-S IgG: он отвечает на вопрос о наличии и порядке величин гуморального ответа на момент взятия крови. Динамический уровень — последовательность измерений у одного пациента, выполненных одним и тем же методом: она показывает, нарастает ли титр после вакцинации или повторного контакта с вирусом, выходит ли на плато, снижается ли и с какой скоростью. Выводы об эффективности конкретной схемы вакцинации или о целесообразности ревакцинации опираются именно на динамику, а не на единичное значение.

Если статический показатель сообщает о факте иммунного ответа, то его сопоставление с антителами к нуклеокапсидному белку разделяет источники этого ответа. Положительные anti-S IgG при отрицательных anti-N IgG соответствуют поствакцинальному профилю у привитых RBD-содержащими препаратами и у лиц, не переносивших инфекцию. Одновременная положительность anti-S и anti-N IgG указывает на перенесённую инфекцию — как у непривитых, так и у вакцинированных с последующим контактом с вирусом. Изолированно повышенные anti-N IgG при низких или отсутствующих anti-S IgG встречаются при угасании поствакцинального ответа на фоне ранее перенесённого заболевания либо при особенностях индивидуального ответа.

Наряду с этим количественное выражение результата используется в наблюдении за группами особого риска. У пациентов с первичными и вторичными иммунодефицитами, на фоне терапии ритуксимабом и другими B-клеточно-истощающими препаратами, после трансплантации солидных органов и гемопоэтических стволовых клеток гуморальный ответ на вакцинацию формируется неполноценно или отсроченно. Повторное определение anti-S IgG через несколько недель после завершения схемы прививок показывает, состоялся ли сероконверсионный ответ, и используется при обсуждении дополнительных доз вакцины или применения пассивной иммунопрофилактики.

Из такого разделения вытекает осторожное отношение к интерпретации абсолютной величины титра. Универсального порогового значения, выше которого гарантирована защита от инфекции или тяжёлого течения, в клинической практике не установлено: соотношение титра и реальной защищённости зависит от штамма возбудителя, нейтрализующей активности конкретного пула антител и состояния клеточного иммунитета, который данным тестом не оценивается. Поэтому количественный результат рассматривается как маркер состоявшегося ответа и его выраженности, а не как прямой эквивалент протективности.

Эта же логика лежит в основе работы с пациентами, перенёсшими COVID-19. Через несколько недель после клинического выздоровления anti-S IgG используются для документального подтверждения состоявшейся сероконверсии, для оценки уровня ответа перед планируемой вакцинацией и для последующего наблюдения за скоростью снижения титра. У части пациентов после лёгкой формы инфекции титр изначально низкий, что само по себе не говорит о неполноценности иммунитета, но влияет на тактику вакцинопрофилактики.

Сводя сказанное к рутинной практике, тест решает три типичные задачи: подтверждает поствакцинальный или постинфекционный гуморальный ответ к S-белку и оценивает его уровень; в сопоставлении с антителами к нуклеокапсидному белку различает вакцинальное и инфекционное происхождение иммунитета; используется для динамического наблюдения у пациентов с иммунокомпрометацией и при планировании ревакцинации.

Ограничения

Результат чувствителен к ряду факторов, которые читаются только в совокупности. Преаналитические влияния связаны с выраженным гемолизом, липемией и иктеричностью образца, нарушением температурного режима хранения и транспортировки, повторными циклами замораживания-оттаивания сыворотки; такие сыворотки могут давать смещение количественной оценки в обе стороны. Помимо преаналитики, на результат влияют клинические состояния: ранний срок после контакта с антигеном, когда сероконверсия ещё не наступила, даёт отрицательный или низкий титр у пациента с реальным заболеванием или недавно завершённой вакцинацией; недавнее переливание плазмы реконвалесцентов и введение специфических моноклональных антител против S-белка приводят к пассивному появлению anti-S IgG, не отражающему собственный иммунный ответ; у новорождённых от перенёсших инфекцию или вакцинированных матерей выявляются трансплацентарно переданные материнские IgG. На ту же картину накладываются фармакологические воздействия: терапия ритуксимабом и другими препаратами, истощающими B-клетки, цитостатики, высокие дозы глюкокортикоидов, ингибиторы кальциневрина и иные иммуносупрессанты подавляют формирование специфических IgG, поэтому отрицательный или низкий результат на фоне такого лечения не исключает способности к ответу при изменении схемы терапии. Существенно и то, что тест количественно описывает только anti-S IgG: он не оценивает нейтрализующую активность антител, не характеризует клеточный иммунитет, не различает антитела к разным вариантам вируса и не сопоставим напрямую с результатами других производителей из-за различий в калибровке. Сводя технические, клинические и фармакологические ограничения вместе, количественный результат сохраняет смысл при сравнении в динамике у одного пациента, выполненной одним методом, и при сопоставлении с клинической ситуацией, статусом вакцинации и сопутствующей терапией.