Для врача 
Антитела IgG к дсДНК в сыворотке крови: подтверждающий тест Crithidia luciliae
Информация об исследовании
Что такое антитела к дсДНК в сыворотке крови, подтверждающий тест с использованием субстрата Crithidia luciliae, IgG, методом непрямой иммунофлюоресценции
Данное исследование предназначено для выявления в сыворотке крови антител класса IgG, направленных против двуспиральной (нативной) дезоксирибонуклеиновой кислоты — дсДНК. Двуспиральная ДНК представляет собой основную форму генетического материала в ядрах клеток человека, и появление аутоантител к ней является одним из наиболее специфичных лабораторных маркеров системной красной волчанки. Проще говоря, иммунная система начинает ошибочно атаковать собственную ДНК, что отражается появлением этих антител в крови.
Ключевая особенность данного теста заключается в использовании уникального биологического субстрата — жгутикового простейшего Crithidia luciliae . Кинетопласт этого микроорганизма содержит исключительно двуспиральную ДНК без примеси одноцепочечных фрагментов, гистонов и других ядерных белков. Это делает метод непрямой иммунофлюоресценции с субстратом Crithidia luciliae высокоспецифичным подтверждающим тестом, который позволяет достоверно дифференцировать истинные антитела к дсДНК от антител к другим компонентам хроматина. Принцип анализа состоит в следующем: сыворотку пациента наносят на препарат, содержащий фиксированные клетки Crithidia luciliae , и при наличии антител к дсДНК они связываются с кинетопластом, что визуализируется с помощью флуоресцентно меченных вторичных антител против человеческого IgG. Характерное свечение кинетопласта расценивается как положительный результат.
Исследование антител к дсДНК методом непрямой иммунофлюоресценции с Crithidia luciliae традиционно применяется как подтверждающий тест второй линии. Его назначают после получения положительного результата скринингового определения анти-дсДНК иммуноферментным методом, чтобы исключить ложноположительные реакции и подтвердить диагноз с максимальной надёжностью.
Клиническое значение
Антитела к дсДНК занимают центральное место в диагностике системной красной волчанки (СКВ). Они включены в классификационные критерии этого заболевания, разработанные Американской коллегией ревматологов и обновлённые критерии EULAR/ACR 2019 года. Специфичность метода с субстратом Crithidia luciliae для СКВ достигает высоких значений, что делает положительный результат весомым аргументом в пользу диагноза. При этом чувствительность теста умеренная, поэтому отрицательный результат не исключает наличия заболевания.
Помимо диагностической ценности, уровень антител к двуспиральной ДНК коррелирует с активностью патологического процесса, особенно с развитием волчаночного нефрита — одного из наиболее грозных проявлений СКВ. Нарастание титра антител нередко предшествует обострению заболевания, что позволяет использовать данный показатель для мониторинга течения болезни и своевременной коррекции терапии. Снижение титра на фоне лечения, как правило, свидетельствует о достижении контроля над активностью процесса. Таким образом, тест важен не только для первичной диагностики, но и для динамического наблюдения за пациентами с установленным диагнозом СКВ.
Антитела к дсДНК также могут обнаруживаться при других системных аутоиммунных заболеваниях соединительной ткани, аутоиммунных васкулитах и аутоиммунных поражениях почек, однако их титр при этих состояниях, как правило, значительно ниже, чем при СКВ.
Ограничения метода
Врач назначает подтверждающий тест на антитела к дсДНК с Crithidia luciliae в ряде клинических ситуаций, каждая из которых требует тщательной интерпретации. Прежде всего, исследование показано при положительном или сомнительном результате скринингового определения антител к дсДНК для верификации находки. Метод непрямой иммунофлюоресценции является полуколичественным и зависит от субъективной оценки свечения оператором, что может создавать определённую вариабельность между лабораториями. Низкие титры антител могут быть трудны для однозначной визуальной интерпретации.
Следует учитывать, что при невысокой активности СКВ или на фоне иммуносупрессивной терапии антитела к дсДНК могут не определяться данным методом ввиду его умеренной чувствительности. Отрицательный результат при наличии клинических подозрений не должен служить основанием для отказа от дальнейшего диагностического поиска. В редких случаях транзиторное повышение антител к дсДНК наблюдается при инфекционных заболеваниях и на фоне приёма некоторых лекарственных препаратов, способных индуцировать лекарственную волчанку. Результат исследования всегда оценивается клиницистом в совокупности с данными анамнеза, клинической картиной и результатами других лабораторных тестов, включая определение антинуклеарных антител, компонентов комплемента и общеклинических показателей.
Когда назначают анализ
- Подтверждение диагноза системной красной волчанки (СКВ) при ранее выявленных положительных результатах скринингового определения антител к двуспиральной ДНК (дсДНК) другими методами (ИФА, хемилюминесценция)
- Дифференциальная диагностика СКВ с другими системными заболеваниями соединительной ткани , при которых антитела к дсДНК, выявляемые методом непрямой иммунофлюоресценции на субстрате Crithidia luciliae, как правило, отсутствуют
- Разрешение диагностических сомнений при сомнительных или слабоположительных результатах скрининговых тестов на антитела к дсДНК, требующих верификации высокоспецифичным подтверждающим методом
- Оценка активности волчаночного нефрита (аутоиммунного поражения почек при СКВ), поскольку уровень антител к дсДНК IgG коррелирует с тяжестью почечного процесса
- Мониторинг течения системной красной волчанки и оценка эффективности проводимой иммуносупрессивной терапии по динамике титров антител к двуспиральной ДНК
- Обследование пациентов с клиническими признаками, соответствующими критериям СКВ : фоточувствительная эритема в виде «бабочки», артрит, серозит (воспаление серозных оболочек), цитопении неясного генеза
- Прогнозирование обострений системной красной волчанки , так как нарастание титра антител к дсДНК нередко предшествует клиническому рецидиву заболевания
- Дифференциальная диагностика аутоиммунных васкулитов с целью исключения или подтверждения волчаночного генеза поражения сосудов
- Обследование при необъяснимой протеинурии, гематурии или быстропрогрессирующем гломерулонефрите для исключения люпус-нефрита как причины почечной патологии
- Комплексная диагностика антифосфолипидного синдрома , ассоциированного с СКВ, при наличии рецидивирующих тромбозов или акушерской патологии
- Исключение ложноположительных результатов скрининговых методов определения антител к дсДНК, поскольку тест с Crithidia luciliae обладает значительно более высокой специфичностью
- Обследование пациентов с лекарственным волчаночноподобным синдромом для разграничения с истинной СКВ — при лекарственной волчанке антитела к дсДНК на субстрате Crithidia luciliae обычно не определяются
- Уточнение иммунологического профиля при полисерозите неясной этиологии (рецидивирующий плеврит, перикардит) в рамках диагностического поиска системного аутоиммунного заболевания
- Оценка иммунологической активности заболевания перед планированием беременности у женщин с установленным диагнозом СКВ для определения степени риска обострения
Как подготовиться к анализу
Определение антител к двуспиральной ДНК (дсДНК) с использованием субстрата Crithidia luciliae представляет собой высокоспецифичный подтверждающий тест, который требует стандартной, но тщательной подготовки. Соблюдение приведённых ниже рекомендаций поможет получить максимально достоверный результат и избежать необходимости повторного взятия крови.
Общие требования:
- Кровь сдаётся строго натощак, после периода ночного голодания продолжительностью не менее 8 и не более 14 часов. В течение этого времени допускается пить чистую негазированную воду без добавок.
- Оптимальное время для взятия крови — утренние часы, с 8:00 до 11:00. Именно в этот промежуток результаты наиболее стабильны и воспроизводимы.
- Непосредственно перед процедурой рекомендуется спокойно посидеть в течение 15–20 минут, чтобы организм адаптировался к состоянию покоя.
Диета:
- За 24 часа до исследования следует исключить из рациона жирную и жареную пищу. Избыточное содержание липидов в сыворотке крови может повлиять на качество иммунофлюоресцентного анализа.
- Откажитесь от употребления алкогольных напитков не менее чем за 24 часа до сдачи крови.
- Последний приём пищи накануне вечером должен быть лёгким. Подойдут отварные овощи, нежирное мясо или каша.
Лекарственные препараты:
- Обязательно сообщите лечащему врачу обо всех принимаемых лекарственных средствах. Некоторые препараты, в частности из группы иммуносупрессоров и глюкокортикостероидов, способны существенно влиять на уровень аутоантител в крови и, следовательно, на интерпретацию результата.
- Не отменяйте назначенную терапию самостоятельно. Решение о временной приостановке приёма любого препарата перед анализом принимает только врач.
- Если вы принимаете препараты, способные индуцировать лекарственную волчанку (например, прокаинамид, гидралазин, изониазид), эта информация особенно важна для корректной оценки результатов.
Другие ограничения:
- Воздержитесь от интенсивных физических нагрузок за 24 часа до исследования. Чрезмерная активность может вызвать временные изменения в иммунологических показателях.
- Курение необходимо исключить минимум за 30 минут до взятия крови.
- Постарайтесь избегать выраженного эмоционального напряжения накануне и в день сдачи анализа. Стресс влияет на иммунную систему и может исказить результат.
- Не рекомендуется сдавать кровь сразу после физиотерапевтических процедур, рентгенологических исследований или ультразвуковой диагностики.
Стоимость исследования
биоматериала 200 ₽