Анализ перестроек BCL2 гена t(14;18)(q32;q21),t(2;18)(p11;q21),t(18;22)(q21;q11) методом FISH

Ген BCL2 , расположенный на длинном плече 18-й хромосомы (18q21), кодирует белок, который подавляет апоптоз, то есть запрограммированную гибель клеток. В норме B-лимфоциты, прошедшие этап созревания в герминативных центрах лимфатических узлов и не получившие нужного сигнала, погибают. При транслокации t(14;18)(q32;q21) ген BCL2 переносится под контроль регуляторных элементов гена тяжелых цепей иммуноглобулинов на 14-й хромосоме и начинает работать постоянно. Клетка перестает подчиняться сигналам к гибели, накапливается и со временем приобретает дополнительные мутации, что создает основу для развития лимфомы. Более редкие варианты t(2;18)(p11;q21) и t(18;22)(q21;q11) устроены аналогично: BCL2 соединяется с генами легких цепей иммуноглобулинов (каппа и лямбда), и результатом также становится избыточная активность антиапоптотического белка. Метод FISH выявляет сам факт разрыва и перемещения участка гена BCL2 непосредственно в ядрах клеток исследуемого материала, поэтому обнаруживает перестройку независимо от конкретной точки разрыва внутри гена.

Перестройка BCL2 является генетическим признаком фолликулярной лимфомы : транслокация t(14;18) обнаруживается у подавляющего большинства пациентов с этой опухолью и считается ее ранним, инициирующим событием. Исследование выполняется на клетках опухолевой ткани, костного мозга или крови при подозрении на B-клеточную лимфому и помогает подтвердить диагноз в сложных случаях: при неоднозначной морфологической картине, при разграничении фолликулярной лимфомы с реактивной гиперплазией лимфоузла и с другими мелкоклеточными B-клеточными лимфомами, у которых перестройка BCL2 нехарактерна. Положительный результат в сочетании с гистологическими и иммунофенотипическими данными служит весомым аргументом в пользу фолликулярной лимфомы. Отсутствие перестройки диагноз не отменяет: часть фолликулярных лимфом, в том числе опухоли высокой цитологической градации и педиатрический тип, развивается без транслокации BCL2, поэтому результат всегда сопоставляется с гистологическим заключением.

Второе установленное применение теста связано с диффузной B-крупноклеточной лимфомой и другими агрессивными B-клеточными опухолями. Перестройка BCL2 встречается примерно у трети таких лимфом, а ее сочетание с перестройкой гена MYC выделяет особую категорию: B-клеточную лимфому высокой степени злокачественности с перестройками MYC и BCL2 (так называемую double-hit лимфому). Эта форма отличается агрессивным течением, и действующая классификация опухолей кроветворной ткани требует ее генетического подтверждения, поэтому анализ перестроек BCL2 входит в стандартное обследование при агрессивных B-клеточных лимфомах наряду с исследованием MYC. Результат влияет на формулировку диагноза и учитывается при выборе лечебной тактики. При интерпретации имеет значение контекст: клоны клеток с t(14;18) в небольшом количестве обнаруживаются в крови части здоровых людей, поэтому изолированное выявление перестройки без морфологических признаков опухоли основанием для диагноза лимфомы не является.